[桂花树价格]根据典型的桂花和香草种植模式研究

　　为了澄清国家生态工程对土壤微生物建设的影响，在西南喀斯特，如农田恢复森林和草原改革和谷物，本研究选取根据土层采集典型的广西环江县（桂花和桂木1号）人工林模式。溶性薄膜样品（层A，0〜10厘米），过渡层（层AB，30〜50厘米），沉积的层（层B，70至100厘米），通过熏蒸用氯仿，荧光定量实时PCR ，磷脂脂肪酸（磷脂脂肪酸）等方法来研究的作物，土壤层和它们对土壤和其机制的微生物生物质的相互作用的影响，以提供一种用于传统文化的转化的理论基础草食动物种植模式中的桂花。果表明，作物，土壤层和它们之间的相互作用对土壤微生物量的碳显著影响，真菌遗传学和PLFA丰bactériens.En一般来说，土壤微生物生物量和PLFA随着土层的加深，总数也会加深。少，但真菌和真菌遗传AGPL的丰度表明B层的最大量，皮肤微生物生物质是在两种培养无显著差异，但细菌AGPL鬼母的量A B层土壤比桂花显著更高，并且在土壤中桂花的AB层的真菌的基因丰度比鬼母号的区域1.一个逐步回归分析显示的显著更大有效钾显着影响土壤微生物生物量碳，真菌遗传丰度，总PLFA和真菌PLFA。上结果表明，牧草种植模式传统的甜桂花香的转变应该更加注重在深土壤中的微生物群落的变化，而钾农田喀斯特地区对土壤微生物有显着影响。

　　国西南喀斯特地区生态环境脆弱，桂花树价格人口，资源，环境矛盾日益突出。水平的人为干扰导致土地质量下降和石漠化，这阻碍了该地区的可持续发展。喀斯特石漠化区，草地畜牧业的发展逐渐取代桂花红薯[1]的传统产业，并已成为解决环境和经济问题的重要途径岩溶喀斯特沙漠化地区。前，在两个桂花作物系统土壤质量和香饲料的理解是主要集中在土壤养分，例如王亚伟韦的差异等人[2]发现桂花种植土壤表层有机碳含量明显低于牧草等生态系统。;弗莱明和月[3]发现桂花土壤有效磷和钾可用加牧场K;地质学[4]发现，在土壤深度增加的模式下，草地返回后，有机碳含量降低;胡和Peilei [5]研究表明，土壤有机碳植草，总氮，磷和总K含量比相应的桂花土壤和氮更高，磷钾含量恰好相反。土壤微生物的角度来看，了解桂花和牧草种植模式下的土壤质量是比较少见的。研究表明，桂花的微生物生物质表面土壤的碳含量比草地下[2，5]，但是对于深的土壤，在土壤中的微生物的差异在研究很少报告两种种植制度。此，目前的研究缺乏对保持和增强传统桂花培养和食草动物饲养功能的地下土壤微生物的重要认识[6]。壤微生物是重要的土壤成分，在维持生态系统的结构和功能稳定性方面发挥着重要作用。壤的微生物生物量，如土壤中，只有一小部分的有机组分的活性材料，但在很大程度上反映土壤[7-8]的质量和对一个显著效果土壤养分的循环和平衡以及物理和化学性质的改善，表明土壤生态系统功能的稳定性和变化[9-11]。
　　用氯仿新鲜土壤样品的熏蒸，微生物细胞膜由氯仿破坏，微生物死亡，裂解细胞和微生物生物质的碳是libéré.La定量实时PCR，能够从遗传丰度的角度定性和定​​量地研究土壤微生物的定量动态。化，脂肪酸，从微生物活性的角度磷脂揭示在环境中的土壤的微生物群落的结构变化，也可以识别和量化微生物，所述识别处理，以避免判断人工的传统方法错误，迄今是最准确的微生物生物质不同的检测方法都有各自的优点和缺点，以指示微生物sol.Comment的充分利用量不同技术的优势是传统桂花和草食动物种植园微生物生物量研究相结合的重要参考价值。此，在本研究中，用氯仿熏蒸，定量实时PCR和磷脂脂肪酸分析（磷脂脂肪酸）被用来确定土壤微生物生物量，和两个典型的种植模式县环江桂，选择：桂花和草料鬼母1号搜索为100厘米微生物群落轮廓表面，同时与土壤性质（有机质，总养分和可用营养素）的组合分析，拟解决以下两个科学问题：差异典型的微生物量下的农业土壤剖面不同的分析模型种植，作物布局土壤和生物质的物理和化学性质之间的关系土壤层引起的微生物土壤，以及饲养动物的现实需求从土壤微生物的角度来看，草地养殖取代喀斯特地区的传统桂花种植园是一个理论基础。

　　
　　项研究是基于古代周示范区（107°55E，24°50N）[12] Xianan，环江毛南族自治县，广西镇西南部，位于云贵高原过渡带的广西山区。是对376〜816米凹陷高度典型的喀斯特，20℃平均气温，年平均降雨量为13891毫米[13]，亚热带季风的典型气候，主碳酸盐岩面积石灰石随着石漠化现象，植被覆盖率现已达到90％，主要是草和灌木。研究区域，根据标准中间坡位，的独立样本桂花选择和鬼母甜香水的分配根据接近度尽可能接近的原则进行的。据5至10个采样点的样本大小是由S型或对角线和浸出层（层A，0-10厘米）和过渡层（层AB 30-50布置根据土壤层收集cm）。自沉积层（B层，70-100cm）的土壤样品不会用可见的肥料收集土壤。出动物和植物残体，石头和在地面可见其它杂质的颗粒，在灭菌牛皮纸拌匀，再通过将添加约20g新鲜的土壤在20ml的无菌离心管中一四。铝箔包装，立即置于液氮中，返回实验室进行土壤微生物遗传丰度分析[14]，保存在-80°C的冰箱中;在4℃下的每一个通过筛子碾磨2毫米，一个用于土壤和磷脂脂肪酸的碳微生物生物质的分析，贮存在冰箱中孔径约50g的两个部分，在一个干燥室温下的空气用于测定土壤的物理和化学性质。参考农用化学品土壤旦宝石分析[15]如通过pH（1:25含水粘土）土壤pH，重铬酸钾的通过容量法测定 - 有机材料的外部加热的测定。气凯氏定氮半微量法的测定;可用的磷通过抗比色法钼提取用NaHCO 3确定为05毫摩尔/ L（Olsen法），购钾用分光光度法的NH 4 OAc火焰提取和水含量测定为通过干燥确定。微生物生物量（的SMBC）萃取采用氯仿熏蒸-K2SO4 - 自动分析仪的有机碳的方法（菲尼克斯8000）[16]，其公式为：= SMBC EC / KEC，其含义是：土壤的非熏蒸土壤熏蒸提取EC有机碳差由KEC转换因子（045）划分的，用于计算微生物生物质的碳。储存在-80℃冰箱中的土壤样品冻干并快速研磨，取出细根并置于无菌的5mL离心管中。用Fast DNA SPIN土壤试剂盒（MP）以及土壤微生物DNA提取方法（Tiangen，Fast DNA Kit）从土壤样品中提取土壤DNA样品。SPIN）。于土壤，MP）说明。取结束后，由该DNA，核酸的DNA浓度测定的传感器值，并且总检测琼脂糖凝胶电泳上的片段大小的12％的记录样品A260nm A280的重量确定nm / A230nm / A260nm值完全满足以下测试条件的要求。
　　配和使用提取的DNA样品。过实时PCR确定16SrRNA基因和真菌真菌18S rRNA基因的拷贝数。据试剂盒的说明2×SuperReal预混合物加（TIANGEN，中国），扩增通过在两个阶段中定量PCR的SYBR Green I荧光已被使用，所使用的仪器是在ABI 7900HT，其分析定量丰度喀斯特地区农田典型土壤剖面的微生物遗传。粒的提取和标准曲线的制备：克隆目标基因后，将其送至深圳市华达基因科技有限公司。了测序，培养选择用于测序的阳性克隆，并将得到的细菌溶液用于质粒提取试剂盒（TIANGEN）。量其浓度提取质粒DNA后，计算拷贝数和所提取的质粒进行梯度稀释用无菌水和总共8个梯度的10倍用作模板定量。用384孔板作为载体进行Q-PCR扩增，并且所有样品重复3次。制标准曲线，横坐标是电量C DNA初始梯度矩阵的对数，纵轴是在每个DNA样品[19]中的溶解曲线的扩增的Ct值产生的扩增的结果是单峰，表明扩增是特异性的。别。这项研究中，扩增效率范围为从95％至100％和R2值大于099更大，指示该标准曲线可用于下一定量分析。壤微生物的生物群落结构分析根据佐亦令搜索方法等[20]，在土壤中的识别和微生物磷脂脂肪酸的分析通过提取，纯化，甲基酯化等进行。脂脂肪酸参考Frostaged等人的方法命名。[21]。种脂肪酸定量表达（纳摩尔/克）通过内标：一个[22]样品（C19 0.10毫微克/微升），采用阿巴耶等人的计算方法计算。[23]和下式：MF =（PFAME×CNG STD×V）/（PISTD×MNG，STD×W），其特征在于，PFAME PISTD每个代表脂肪酸和甲基，且峰面积内标，天然气，如std内标浓度（ng /微升）的，桂花树价格V（UL）表示样品体积，MNG，STD是标准的内部摩尔质量W（g）表示土壤的干重。这项研究中，12：0anteiso，13 0anteiso，14：0，15：0anteiso，15：0iso，15：0，16：0antiso，16：1ω7c，16：0，17：1isoω9c，17：0antiso，17： 0iso，17：1ω8c，17：0cycloω7c，18：1ω7c，18：15C，190cycloω7c用于识别细菌，18：1ω9c和18：2ω6c表征真菌。用SPSS软件180的实验数据进行处理，并种植图案土壤微生物进行双向ANOVA和SNK作为多重比较因子分析处理（P <005），改变物理和化学性质种植模式，微生物引起的土壤和土壤生物量，遗传丰度和PLFA之间的关系由回归分析方法确定。Excel绘制2010饲料作物鬼母1号和桂花种植在两种方式：pH和磷分别为可用在B层中的最高的，比所述层的显著更高A和AB（P <005） ，同时总氮，有机碳和有效钾。B层的性能是最低的：不同类型的种植，相应的土壤层的，与所述AB层外，钾含量可用不是非常不同（P> 005），该层A和B均显着高于Guimu No.1（P <005），而总氮，有机质等无显着差异。
　　（P> 005）（见表1）。差双向分析的结果（表2）表明，作物和土壤层具有对土壤和微生物的物理和化学性质不同的影响，包括可用磷，材料有效钾，真菌遗传丰度和细菌PLFA。者都具有重要作用，作物与土壤之间具有重要的相互作用（P <001）。中的数据还表明，土壤层对异形土壤和微生物的物理和化学性质的影响大于作物的影响。1（a）示出了接地层具有对土壤的微生物生物质的碳的一个重要效果：相同种植图案，该表面层（A层）是最高的（P <005）;在同一土层中，土壤微生物生物量牧草与桂花之间碳含量无显着差异（P> 005）（图1（a））。

　　这两种种植模式，细菌遗传学丰度的土壤中的每一层中的分布（上相同的干土）为111×1010×202×1010拷贝/克（图1（b）），丰真菌遗传学意义重大。菌遗传丰度低于442×106-214×107拷贝/ g（图1（c））。相同的种植模式下，细菌丰度显示A层显着高于B层，而真菌遗传丰度则完全相反：B层显着高于层B A和，在牧场种植模式中，细菌和真菌具有遗传丰富性。AB的平均度为在AB层（P <005）中最低的，土壤遗传丰度在牧草种植面积比在桂花种植面积显著降低（P <005） 。种植的相同方式，总磷脂脂肪酸和细菌磷脂脂肪酸显示出最高的层A，而真菌磷脂脂肪酸表现出最高的层B（P <005）（图1（F））;土壤的同一层中，总磷脂脂肪酸和真菌磷脂脂肪酸的量不是两个种植模式（P> 005）之间显著不同，但在B层中，细菌磷脂脂肪酸的量比的显著更高桂花（P <005）（图1（e））。归分析不影响微生物土壤剖面的基本物理性质和化学性质，访问主因素影响（表3），结果表明：总氮，pH值，有机质影响遗传细菌的丰度，细菌的总量达磷脂脂肪酸磷脂脂肪酸的显著影响因子，钾释放，已经对土壤微生物生物质的碳，真菌遗传丰度和磷脂脂肪酸一个显著影响，以及总PLFA。整个截面中，微生物生物量，总PUFA，细菌丰度和遗传PUFA含量最高在表面层（A层）和比深层显著更高（层AB ，层B），这与先前研究的结果一致[24-25]。于土壤剖面，表面土壤的细根生物量富集和有机含量高，以及良好的气体透过性以及温度和适当的湿度的条件下促进微生物的生长。而，随着土壤层的加深，由于养分的垂直渗漏和栖息地条件的退化，土壤的最深部分相对较差。究表明，真菌首选营养丰富的有机物质，而细菌在富含营养的土壤中更为活跃。菇的遗传丰富和真菌PLFA量分别在层B.最高有在表面层（A层）和微生物群落之间土壤的微生物群落没有显著差异深层土壤，可能是由于桂花和饲料根系发育的差异。壤养分之间的差异导致深层土壤中微生物生物量的显着差异。研究表明，樨根80％以上分布在土壤层从表面小于40厘米，而填充物是为1的深度深的根系到2μm或甚至更深[26]。
　　的土壤剖面，在种植园表面和深桂花可用的P和钾含量比在牧场显著较高，而氮和有机质樨和放牧的总含量在相应的土壤层中没有显着差异。表明农业和免耕对喀斯特地区农业土壤中土壤养分的影响是非常不同的，饲料支持在深度维持土壤养分。中，作为分解剂的细菌和真菌在两种种植方式下对不同的土壤环境具有不同的适应性。菌发挥土壤有机质分解的重要作用，它可以分解在困难的有机物质纤维素和木质素分解因为它们的结构particulière.Les的细菌有有机物利用效率低。原真菌遗传丰度在桂花令人愉快的香味的AB层显著降低，而细菌磷脂脂肪酸的B层中的量为大于桂花愉快香味显著更高，这表明饲草种植方式更有利于稳定和深层碳储量。

　　
　　与先前研究的结果类似。究发现，退耕地草地后的农业土壤的固碳能力已显著增加[27]和多年生草本是有利于存储和固定深层土壤有机碳和其固定土壤碳储层的能力明显高于冬小麦土壤。究已经表明，在0〜50厘米培养桂花土壤有机碳含量的剖视图中培养各[5]，其示出，相对于培养草原农田一个桂花鬼母下面草地土壤提高土壤活性土壤中有机碳组分和有机碳积累更有利于稳定土壤中稳定的土壤碳库。释在喀斯特地区种植牧场的可行性，而不是传统的桂花种植方法。植模式影响土壤和土壤微生物的理化性质：由于施氮，土壤微生物生物量在喀斯特地区显着增加，表明氮有一定的限制土壤生产力和微生物活动的改善[28]，显着影响剖面。壤细菌的遗传丰度，土壤pH对在土壤，水，气，热从接地的存在和营养物有效性的显著效果，并且也影响到活动微生物土壤，显着影响土壤微生物。脂脂肪酸的总量，有机物质在土壤喀斯特量进行输入的动态平衡和接地植被的分解和它的根有机物[29]。水平喀斯特分解土壤有机质强化，进而影响土壤微生物，并显着影响细菌PLFA的数量。于岩性喀斯特的特殊性质，在大多数土壤中的总钾是通过一种特殊的晶体结构确定：仅一个长期老化可通过释放矿物晶体吸收和使用植物[30];剩余素食者主要由可用的钾确定[31]，而在喀斯特区域的钾是由基体材料的限制，很可能失去地面水和地下水二进制[32] 。此，有效钾是影响农业土壤岩溶区作物系统变化后土壤质量和微生物变化的重要因素，对土壤微生物生物量碳有显着影响。菌遗传丰度，PUFA和总AGPLs。了表征使用的微生物生物质的微生物生物质，丰度和遗传AGPL的量的，对地球更敏感的影响（表2）下，表明垂直漏极营养素在作物系统中土壤和微生物质量发生变化后的喀斯特地区应注意：种植系统对其没有显着影响土壤微生物生物量和总PUFA，但对真菌遗传丰度和细菌多不饱和脂肪酸，表明地下微生物群落需要得到更多的关注。构变化，同时使用土壤微生物生物质的碳，以指示微生物生物量，促进了土壤的种群和微生物数量的测量[33]，同时忽略微生物功能多样性的生态效应[28 ，34]，由细菌和真菌遗传丰度表明微生物量超过偏移量[14]，包括土壤微生物生物量，真菌和细菌的遗传丰PUFA的碳都受系统种植和土壤层。互作用的影响更为敏感，这表明有一些益处的微生物量在不同技术规格的土壤，但如何进入不同的技术研究成果的共同标准的微生物生物量的其它指标土壤，是未来研究的重要组成部分，加上地下微生物多样性和生态系统功能。这两种种植方式，有微生物表土之间没有显著差异，但在深层土壤中，草地上吃草的基因丰度比香桂花显著降低而细菌PLFA量较桂花香，说显著较高：桂花和饲料种植在岩溶地区。模式的改变应该更加注重在深土壤中的微生物群落的变化，并与桂花相比，牧场可能会更有利于稳定的碳库深土壤的稳定。植模式导致土壤剖面，这影响了微生物的土壤剖面，其显著影响微生物生物量土壤钾C的生活条件，真菌丰度的物理和化学性质的变化和遗传AGPL，总AGPL表示，影响文化系统的变更后改变土壤微生物群落农业用地的重要因素钾喀斯特地区，但还需要进一步核实。蒸用氯仿，实时PCR和磷脂脂肪酸分析技术（PLFA）检测和土壤的微生物生物质的适应症，越土壤影响敏感的问题，但培养系统生物量的影响土壤微生物必须从丰富和数量上继承AGPL关注地下微生物群落结构的变化。果表明，不同技术的研究成果对微生物多样性与地下水功能的耦合研究具有重要意义。
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