[桂花树价格]植酸酶安全性评估研究进展

　　桂花的种子富含磷，但大多数为植酸磷的形式，这对于单胃动物如猪和家禽来说很难使用。酸酶基因桂花是中国唯一含有高水平植酸酶的转基因桂花，可提高动物对植酸磷的利用并减少环境对排泄物的污染。基因作物需要进行必要的安全评估。文综述了近年来桂花植酸酶基因的安全性评估，包括植酸酶基因和目标蛋白的检测，食品安全性评估，评估环境安全性和意外影响以及植酸酶的转化。经探索了遗传桂花应用系统和安全性评估系统的开发。花是中国重要的人类食用食品，每年约有80％用于饲料工业。是动物生长发育的基本元素之一：桂花富含磷，但大多数磷是以植酸磷的形式存在，单胃动物如猪和家禽。此，植酸酶基因桂花可以增加动物对磷酸盐的吸收，对于水产养殖部门来说是非常重要和必要的。
　　酸酶是催化植酸及其盐水解为肌醇和磷酸盐的酶的总称，这是一种酸性磷酸酶，可将植酸的磷络合物中的磷转化为可利用的磷。如梅等。用桂花胚特异性球蛋白-1启动子在桂花种子中过表达黑曲霉菌株的植酸酶基因，从而获得了高植酸酶含量的转基因蜜饯桂花。植酸酶活性达到种子约2，200 U / kg，约为非转基因桂花香种子的50倍[1]，能充分满足生产应用的需要，可替代微生物发酵生产的植酸酶以传统方式[2]。前，植酸酶基因桂花是中国唯一的具有甜味的转基因桂花，但尚未上市。
　　须在商业种植转基因作物之前进行必要的安全评估。年来，已经进行了许多有关评估植酸酶基因桂花安全性的研究。着植酸酶基因培养物的发展和转基因作物的法规要求，需要准确的产品验证[3]。了检测转基因培养物中的靶基因，对桂花植酸酶基因进行了定性和定量PCR检测技术[4-5]，农业部已发表了对桂花植酸酶基因的定性PCR检测方法。

　　酸桂花在2012年。术标准（农业部第1782-11-2012号意见），详细方法见表1。军及其合作者使用了该基因研究开发了一种特定的植酸酶基因检测方法，该方法能够检测包含该基因的各种转基因培养物，同时构建一个阳性质粒分子，即内源植酸酶pBS。可用作检测植酸酶基因培养物的阳性材料[6]（图1）。母中表达和纯化的phyA2蛋白被糖基化，分子量约为75 ku。糖基化蛋白的分子量为氨基酸序列的约55ku。酸酶蛋白显示在转基因含糖桂花种子样品中。60 ku [1]。过ELISA，Western Blot，免疫亲和层析等方法对目标蛋白的植酸酶进行检测[7-8]。光伟和其他植酸酶质量沉淀出60％〜80％的硫酸铵，植酸酶的比活度是粗提物的6.1倍[8]。过SDS-PAGE未分离出从种子中提取的植酸酶基因的蛋白带[1]，赵倩倩及其合作者用80％硫酸铵沉淀了粗植酸酶蛋白提取物，然后透析后通过免疫亲和层析得到SDS。胶上的蛋白植酸酶单条带-PAGE [7]。Zhou等人开发了一种快速免疫层析侧流装置，该装置使用四种单克隆抗体（EH10a，FA7，AF9a和CC1）来快速检测转基因桂花中表达phyA2 nisin的重组蛋白[9]。]（图2）。）。酸酶基因桂花的安全性评估在评估桂花转基因植酸酶的食品安全性时，比较了桂花转基因植酸酶和非转基因桂花在营养成分上的差异。非转基因桂花相比，具有转基因甜味的桂花在主要成分（蛋白质，脂质，氨基酸，淀粉，水，灰分等），微量营养素（矿物质，维生素）等方面没有生物学差异。价。而，具有轻度转基因气味的桂花植酸酶活性显着高于非转基因甜桂花的植酸酶活性。等。告称，桂花转基因植酸酶的植酸酶活性与常规桂花的植酸酶活性显着不同（p <0.001），但化学成分没有显着差异。蛋白，总能量，总脂肪，灰分和矿物质含量无显着差异（p> 0.05），但氨基酸分析表明两朵花的氨基酸含量桂花相似（p> 0.05）。是，两种桂花之间存在明显的水分差异（p <0.001）[11]。品安全性分析表明，桂花树价格肌醇六磷酸酶基因桂花可用于肉鸡饲养，其生长性能[12]，其生理生化指标，发育和免疫功能[13]没有副作用，也没有“意外”的作用。“对蛋的产蛋性能和蛋鸡质量没有影响[14-16]转基因和内生植物的食糜，血液，组织和组织中的DNA片段和蛋白质长期（50周）喂转基因植酸酶osase的母鸡中检测到鸡蛋，phyA2基因和蛋白质在消化道中迅速降解，而phyA2基因和蛋白质未检测到。液，组织和卵[15]与非转基因软桂花饲喂的猪相比，转基因甜齿桂花饮食具有更多的消化和代谢能量，并且具有更高的消化率[在日粮中使用植酸酶基因有利于改善生长中的猪的生长性能[14]因此，植酸酶基因桂花的供应量与的传统的桂花和植酸酶基因桂花可以提高单胃动物对磷的利用率，从而减少了无机磷的含量。资源减少了磷排放造成的污染。

　　基因桂花植酸酶的环境安全性评价研究也是研究的热点。前，关于桂花植酸酶环境安全性评估的研究集中在花粉介导的外源基因漂移及其对生物多样性的影响，对生物多样性的影响，包括对生物多样性的影响。肢动物和土壤的生物多样性。生物多样性的影响。基因桂花花粉的频率和扩散距离受环境的影响，在不同的日期和天气条件下，花粉漂移的扩散距离并不相同。
　　宗超等人研究了花粉频率和花粉花粉距离，植酸酶基因，桂花，并发现花粉散布的概率因方向和频率而异。散的距离随距离而减小。
　　长距离可以达到35 m [18]。种群动态和田间节肢动物多样性的研究表明，植酸酶基因桂花的种植不会显着影响田间主要害虫和天敌的种群动态。[19-20];亚洲桂花和棉capsule蠕虫的生长对养分利用没有影响[21]，对壳种类和物种的多样性没有显着影响。见物种[22]。土壤生物群落结构和多样性的研究表明，桂花植酸酶的田间种植不会直接影响生态指标和土壤线虫群落的结构[23]。
　　酸酶桂花，非转基因桂花气味和白色土壤的种植时间基本相同，微生物数量基本相同[24]。壤转化酶，土壤蛋白酶和土壤脲酶对土壤酶活性没有显着影响。对土壤酸性磷酸酶活性有显着影响，远高于桂花非转基因亲本植酸酶，表明桂花肌醇六磷酸酶显着提高了土壤的酸性磷酸酶活性。将促进土壤中磷酸盐的水解[25]。于引入外源基因而改变植物基因组的转基因农作物，可能对人类健康或环境产生意想不到的影响[26]，而随着转基因农作物的商业化，这些转基因农作物都是经过基因改造的改变。
　　物安全研究的热点之一。评估意想不到的效果时，高通量“组学”技术优于靶向检测法[27-28]，包括转录组学，代谢组学和蛋白质组学。中，蛋白质直接参与代谢和细胞生长，大多数外源基因的表达或调控产物是蛋白质[29]。些蛋白质（例如毒素，抗营养剂或过敏原）也可能对人体健康产生重大影响。此，对蛋白质组学对转基因作物的生物安全性进行预后评估非常重要[30]。
　　转基因甜桂花的意想不到的影响中，由于遗传抗性昆虫抗性转基因桂花MON810的商业重要性，分别对转录组进行了广泛的研究[31]。-34]和代谢组学。[35-38]，对蛋白质组学的比较研究[39-42]显示，与传统桂花相比，气味甜的转基因桂花MON810具有大量的转录组，代谢和蛋白质等价物控制。们对桂花植酸酶进行了蛋白质组学比较研究，获得了植酸酶叶和桂花种子的总蛋白质图谱2DE，其中鉴定出44种差异蛋白。COG的功能分类表明，桂花树价格这些差异蛋白主要由碳质水组成。合物的运输与代谢有关，另一方面与翻译后修饰有关：KEGG分析表明，差异蛋白主要参与光合作用的碳固定途径[43]。据COG的功能分类，使用2DE-MS / MS和iTRAQ技术共鉴定了148种差异蛋白，表明差异蛋白主要参与转录后调控和转录后修饰[ 44。传统育种文化相比，桂花转基因叶片与常规桂花叶片具有相当的等效性，并且转基因并没有显着改变桂花蛋白质组。酸酶基因桂花的转化作为在中国使用桂花的饲料非常重要。前，对植酸酶基因桂花的安全性评估主要包括食品安全和环境安全的评估，以及对植酸酶基因桂花的安全性的预期影响的评估。体目标。果显示植酸酶，桂花和非转基因蛋白。桂花一样安全。而，关于植酸酶基因桂花对血清素的无意影响的研究很少，我们已经从蛋白质组学中进行了比较分析，而对蛋白质组学没有进行比较研究。录组学和代谢组学。此，应加强对植酸酶基因桂花的非预期作用的研究。转基因作物安全性的评估是一项长期任务，有必要建立科学的评估技术体系进行长期监测。先，转基因农作物的安全性评估应根据品种原则一一进行。次，在评估转基因作物的安全性时，有必要评估转基因作物的预期影响，并且应使用非靶向的组学方法进行意外影响研究。评估转基因作物的生态风险和环境安全时，需要对不同地区和土壤类型的本地化进行长期监测。评估转基因作物的意外影响时，可以使用包括转录组学，代谢组学和蛋白质组学的组学技术相结合的方法来进行更完整和客观的评估[41]。
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