桂花发芽期和播种期海藻糖合酶转基因抗旱性的
在模拟干旱条件下，使用PEG溶液，其发芽率，伤害率，芽根比，叶片含水量，叶片SOD活性，POD活性和研究了桂花不同品种的MDA（2个转基因品系及其各自的受体对照）。种子箱，花盆和田地中已比较了其抗旱性。果表明，发芽期和播种期的抗旱性基本相同，两个转基因品系（T09100-3和H5T37）的抗旱性均高于其各自的受体（组合为31和31）。178）。旱是影响全球农业生产的主要环境因素之一。不仅影响植物的正常生长发育，导致农作物减产，而且使生态环境恶化[1]。立新的抗旱种质和选择新的抗旱和耐旱品种是改善当前作物品种的重要研究方向[2]。花种质资源抗旱性的鉴定和评价是抗旱种质的利用和品种改良的重要基础研究。花是中国最大的粮食作物，需要更多的水并且对水分胁迫更加敏感。旱是影响桂花产量的重要限制因素[3]。利用转基因技术提高桂花抗旱性的研究中，一些单位已成功转化了桂花上的海藻糖合酶基因[4-5]，从而丰富了文库。花种质资源有一定程度，但对桂花酶基因抗旱性的科学评价报道较少。鉴于此，作者研究了不同品种的发芽率，伤害率，芽根比，叶片含水量，叶片的SOD活性，POD活性和MDA。PEG溶液中模拟干旱条件下的桂花（2个转基因品系及其各自的受体对照）。容，并在种子箱，花盆和田地中比较它们的抗旱性。验材料试验材料由山西省农业科学院旱地农业研究中心种质资源办公室提供和制作（表1）。今年4月，使用15％PEG-6000（wv）作为渗透介质测试测试材料的发芽； 2016年5月5日，将测试材料种植在花盆中，桂花树价格每盆10株植物，每个品种6种。池的直径为35厘米，高度为30厘米。幼苗出苗到第五片叶子完全扩张的这段时间内，植物的供水充足，并且进行了以下操作：确定叶子的保水能力体外[6]；在网锅中清洗4个品种的生根植物（转基因品系及其容器），并用500 ml的0、15％，25％和35％聚乙二醇（PEG）的荷兰营养液浸泡（每个品种5株） ，模拟7天的干旱胁迫，测量SOD酶活性，POD酶活性和MDA酶活性，比较酶活性的变化规律，在测试前精确称重0.1 g样品，并添加9倍根据重量比（g）：体积（mL）= 1：9 L磷酸盐缓冲溶液）匀浆培养基的体积（0.2 mol / pH 7.0），转化为组织匀浆的10％在冰浴条件下，以3500rpm离心10分钟，然后测量上清液。下的一半植物用作继续供水的对照，另一半停止了7天。水分胁迫下，观察植物的自然形态变化。2016年5月13日，分别在种子托盘和田间播种和播种测试材料。两种转基因品系与它们各自的接受者一起播种在同一种子托盘中，以观察播种期的出苗率，均匀度和耐旱性。芽测试后，用自来水在每种测试物质和渗透介质的水中冲洗发芽的种子，吸收水分，将其切成两部分，将芽和根切成薄片并将其干燥。箱在80℃。的重量和干重。过称重法测量体外叶片的保水率。有足够水分的植物中取出3片叶子，让它们处于相同的环境中，定期称重，并计算叶子的水分含量（天然鲜重的百分比）。
公式中，Wf是叶子的自然新鲜重量，Wd是每个时期的叶子的干重。试剂盒法测定SOD酶活性，POD酶活性和MDA酶活性，取离心后的上清液，按照试剂盒的说明制备溶液。定SOD酶的活性。合后，以3500 rpm的速度离心10分钟，以550 nm的波长取上清液，用光程为1 cm的比色皿，将双蒸馏水设置为0，以确定每个试管的吸光度。POD酶活性的测定。合后，以3500 rpm离心10分钟，取上清液的波长为420 nm，用比色皿用1 cm光路，并用两次蒸馏水调节至0，以确定每个管的吸光度。定MDA酶活性。合后，以3500 rpm离心10分钟，取上清液的波长为405 nm，光直径为0.5 cm，并将双蒸馏水的量调节至0以测定吸光度每个管子。察到均匀性的出现。
盒子和野外播种后，在自然条件下观察到播种的速度和均匀性。察叶子的卷曲和正义。栽胁迫后干旱的自然形态指标是在下午3:00记录的，使用视觉方法记录叶片的弯曲度和直度。用15％PEG-6000（wv）作为渗透介质来模拟干旱条件。表1所示，两个转基因品系及其各自的受体的发芽率和破坏率与该品种的抗旱性密切相关。
了提高抗旱性，发芽和发芽期间根的体积经常发生很大变化，主要表现为根/根比的降低。表2中可以看出，在PEG-6000渗透培养基的模拟干燥条件下，其15％（wv）时，两个转基因品系与其各自受体的茎和根比均低于对照（萌发于水），表示测试材料渗漏。境中的发芽率降低，芽根比也降低，这种形态变化易于承受逆境（例如干旱和冷害）[8]。两个转基因品系的芽根比均低于其各自的受体，这与两个转基因品系在田间的规律性和出苗率一致。同时期桂花品种叶片水分含量的比较采用五叶和一心期，通过转基因基因鉴定桂花的抗旱性。藻糖合酶通过保水法。3表明，在足够的供水条件下，桂花不同品种的含水量差异（天然鲜重百分比）很小；然而，随着体外时间的增加，差异逐渐变大。31，T09100-3、178和H5T37品种的桂花离体叶片含水量下降幅度从高到低依次是完全的，这与经过一段时间的枯萎是一致的。栽胁迫和田间表现。一致的。SOD是重要的保护性酶之一，可使细胞抵抗活性氧的破坏。在去除过氧化物，H2O2和超氧自由基，减少或防止羟基自由基的形成以防止膜系统受损方面起着重要作用。受水分胁迫的植物的SOD活性水平与其对干旱的抵抗力密切相关。受轻度或短期水分胁迫的植物的SOD活性增加，但在严重或长期胁迫条件下其SOD活性降低[9]。测试的结果表明，随着PEG浓度的增加，转基因品系及其各自受体植物的SOD活性先升高后降低（图1）。15％PEG处理下，SOD活性的增加表明它积极参与了活性氧的消除，而当处理浓度为25％时，SOD活性在SOD活性中达到了。对照相比，转基因植物T09100-3和H5T37在PEG浓度为25％和35％时的SOD活性与对照相比，植物31和178开始降低和降低。升趋势。PEG胁迫下，转基因植物的SOD活性明显高于对照。表明转基因植物具有更好的抗旱性。PEG浓度对桂花叶片POD活性的影响POD是植物中另一种重要的保护酶，POD和CAT共同作用将SOD酶产生的H2O2进一步还原为H2O。干旱胁迫下，POD和SOD活性的变化基本相同：在胁迫初期，POD活性增加，表明充足的水分胁迫可以提高植物的适应性。桂花在干旱中；但是，随着PEG浓度的增加，POD活性开始下降。于抗旱性好的品种的浓度下降幅度要小于抗旱性低的品种，因此POD是测试桂花抗旱性的标准之一。试结果表明，当PEG浓度为15％时，四种材料的POD活性增加。
浓度达到25％时，对照组31和178的POD活性开始降低，并且在浓度为35％时降低。PEG浓度为35％时，相应的转基因植物呈增加趋势。此，在干旱胁迫下，转基因植物细胞可以更好地抵抗活性氧的破坏并维持其正常生长发育。MDA是脂质膜过氧化的主要产物，其含量反映了质膜过氧化的强度和质膜的破坏程度。究表明，在干旱条件下，不同基因型桂花叶片中MDA的含量增加，可以通过其抗旱性来判断。图3中可以看出，随着PEG浓度的增加，植物叶片组织中MDA的含量也逐渐增加。对照31和178相比，转基因植物T09100-3和H5T37的增加显着较小，表明遭受干旱胁迫的转基因植物的质膜过氧化程度低于对照，也就是说，它们的抗旱性强于对照。基因品系及其各自的受体分别播种在种子箱和田间中。基因品系比对照早3天出现，并且出现更好。田间干旱出现期间，种子箱被人为地蹲下以控制水量。图4、5和6中可以看出，转基因品系比对照具有更强的抗旱性。
图7和图8中，我们可以看到从出苗到第五次付款，这两个转基因品系及其各自的受体被播种在花盆中。叶片完全展开时，向盆中的植物提供足够的水分，并在灌溉后施加7天的水分胁迫。果表明，转基因品系被拉伸和拉直，而对照的接受者使黄叶萎缩和卷曲，表明转基因品系比对照更耐旱。藻糖是植物抵御各种压力环境的保护剂[7]，它广泛存在于酵母，藻类和某些维管植物中，最高含量达到10％[10]。严峻条件下，例如脱水和脱水，在海藻糖细胞表面形成独特的保护膜，可以有效保护蛋白质分子的不变灭活，从而保持生物体生命过程的生物学特性。有机体对干旱具有很强的抵抗力。11-12]。此，山西省农业科学院旱地农业研究中心利用基因枪法将海藻糖转移至近交系31和178，并获得了大量的转化体（菌株）。10年；这项研究是使用T09100-3和H5T37线进行的。
芽期和播种期的抗旱性研究。验结果表明，研究方法在发芽期和播种期的抗旱性基本相同，证明两种转基因品系（T09100-3和H5T37）具有较高的抗性。各自的受灾者干旱。索方法简单且适用。可能在不利的环境中选择抗旱性。PEG模拟的水分胁迫条件下，测定了种子的发芽率，SOD酶活性，POD酶活性的变化规律以及在播种期分离出的叶片的保水性。同的转基因品系抗旱性是一种实用的实验室方法。
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