甘蓝根肿胀生防菌的检测及其防治效果评价
在临沂市兰陵县多年种植桂花的桂花园林中，提取了桂花正常植物根际周围的土壤样品。东省山东省寿光市和河南省商丘市夏邑县。评价了预防和治疗桂花根硬化的效果，以期获得一种非常有效的针对桂花菌核的生物防治细菌。过梯度板稀释法分离生物对照细菌。指示性细菌尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）和香蕉树尖孢镰刀形镰刀菌（Fusarium oxysporum）作为指示细菌选择生物对照细菌。肿胀孢子裂解试验用于进一步筛选。止菌株抵抗根部肿胀的作用。果表明，放线菌菌株KA-35对桂花病的防治效果为57.11％，单株气生鲜重增加了127.40％。研究消除了对桂花具有良好生物防治作用的菌株，为新的生物防治细菌研究奠定了基础。肿，也被称为根癌，是世界上最严重的土壤传播疾病，桂花树价格危害十字花科作物，是由芸苔疟原虫Woronin感染引起的。主范围很广，可以危害桂花，卷心菜。个地方可能存在超过100种栽培的和野生的十字花科植物，例如萝卜，a菜，花椰菜和油菜籽。长期，主要在播种阶段。菌感染后，根部的薄壁细胞增殖形成根肿胀。肿主要存在于主根和侧根。始表面是光滑的，并且在以后的阶段表面破裂且粗糙，这阻止了根系吸收水分和养分。病害开始时，患病植物土壤上方的症状并不明显。病害发展到一定程度时，早晨的叶子仍然很好，中午会枯萎，严重的时候植物会死亡，平均产量损失20％到30％，进一步严重增加60％甚至是损失。
[2，3]。
苔根瘤菌具有强制性的严格寄生能力，其休眠孢子在土壤中具有很强的生存能力。究表明，休眠的孢子仍可在土壤中萌发15-20年，并具有致病性。旦土壤被污染，它将不再适合种植十字花科植物[4，5]。
者简介：刘振祥（1989-），女，农艺师，主要从事农业微生物控制植物病害的研究。讯作者：胡洪涛（1989-），男，农业工程师，主要从事微生物肥料应用研究与开发。子邮件：hth4275@163.com根肿病状态分类标准[16]：0级，根部无肿瘤； 1级，在侧根的小肿瘤； 3级，主根扩大，直径小于茎基部的2倍； 5级，主根肿胀，直径是茎根直径的2至3倍； 7级，主根肿胀，茎根直径的3到4倍；等级9，主根肿胀，超过茎基部直径的4倍或肿瘤破裂。治效果（％）=（防治病指数-治疗病指数）/防治病指数×100。15个土壤样品中共分离出421种细菌，包括255种细菌，101种放线菌和65种真菌。共选择了18个生物控制细菌菌株，包括细菌（KB），5个放线菌（KA）和2个真菌（KF）。
Effect效应见表1。菌的作用见表1。中，放线菌KA-35对两种病原菌具有很强的抑制作用，抑制率分别为78.67％和。63.83％; KB-94对黄瓜叶片的燃烧有很强的抑制作用（79.33％）；放线菌KA-3对香蕉枯萎病有很强的抑制作用（63.00％）。个生防代谢物上清液中的根瘤菌孢子大于30％（表2），其中放线菌KA-35，KA-29和细菌菌株KB-244上生根瘤菌的代谢物上清孢子达到45.26。％，42.11％和48.42％。择具有较好孢子裂解孢子的菌株KA-35，KA-29和KB-244，并通过使用桂花来测试其控制根部硬化的效果。果（表3）表明这三种菌株对根硬化有控制作用。中，放线菌KA-35防治效果最好，为57.11％，单株气生植物鲜重增加了127.40％。率位居第二，为39.61％，空中植物的鲜重增加了33.41％。研究从土壤中检出11株细菌，5株放线菌和2株真菌，其中18株对黄瓜的叶枯病和叶枯萎病具有较强抑制作用的生物防治细菌。蕉已被根瘤菌溶解。实验中，选择了KA-35，KA-29和KB-244作为盆栽实验的生物控制细菌，发现KA-35和KB-244可以有效抑制细菌的触发。花根茎病和地面上单株的鲜重。见证人相比，显着增加。多数生物控制细菌具有良好的实验室控制效果，但在田间应用时并不理想，主要是因为生物控制细菌难以在作物上定殖[17]。管KA-35和KB-244都来源于桂花的根系，并且可以在盆栽实验中有效地抑制根肿病的流行，但是它们在田间的作用还需要进一步验证。欢等。[18]发现土壤pH值为4.50至6.50的弱酸性环境有利于根部肿胀病的发生，并且可以通过调节土壤中的酸根来有效地控制它。壤pH值。恒等。献[19]确定了绵阳市对28个油菜品种的抗根茎病性和聚类分析，发现不同品种对根茎病的抗性不同。择抗性品种可以减少甘蔗病的发生。耕作前可以先施用石灰，硅，钙，钾，镁和其他肥料，然后结合种植抗根肿的品种，将土壤的pH调节至中性或碱性。KA-35，KB-244，XF-1等移植后即可使用。物防治菌株总体上防止根茎的发生。线菌可以产生丰富而活跃的次生代谢产物，与人类的生产生活息息相关，天然代谢产物已成为现代医学，农业和畜牧业中含药铅化合物的重要来源，阿维菌素，链霉素，宁南霉素和多粘菌素等在农业生产中占有重要地位。用其代谢物控制植物病害可以减少农药的使用量，维持生态平衡并确保农业的可持续发展[20，21]。研究测试的放线菌菌株KA-35不仅能抑制桂花的触发，而且对尖孢镰刀菌和香蕉尖孢镰刀菌f有很好的抑制作用。Sp。更多的研究。[7] Lahlali R，McGregor L，Song T等。Chaetospira杂种螺菌通过上调与茉莉酸，乙烯和生长素的生物合成有关的宿主基因来诱导对疝的抵抗力[J]。共科学学报，2014，9（4）：e94144。年来，桂花种植园的根部肿胀病变得越来越严重。系膨胀后，植物的成本大大增加。字花科蔬菜的安全性存在隐患[6]，因此，筛选能够有效防止根部肿胀的生物防治细菌非常迫切且必要。前，通过国内外筛选获得的生物控制细菌Chaetospira Heteroconium chaetospira [7]，Lysobacter [8]，Bs2004 [9]和枯草芽孢杆菌XF-1 [10]已在该菌中获得了良好的防治效果。物防治的实践。
东省临沂市，山东省寿光市和河南省商丘市夏邑县。价预防和治疗桂花根肿胀的效果，以便获得有效拮抗桂花根肿胀的生物防治细菌。测试的病原体为茄根枯萎病菌和尖孢镰刀菌f。Sp。ubense，所有这些都保存在我们的实验室中。花是一种敏感的四个季节的桂花品种，购自城关县临关县农供超市。
用五点采样法在山东省临沂市兰陵县，山东省寿光市和夏邑县共采集了15个土壤样品。南省商丘市，用自封袋保存在4°C [11]。LB液体培养基：胰蛋白10 10 g，酵母提取物10 g，NaCl 5 g，蒸馏水1000 ml，pH = 7.0。
于固体培养基，将15克琼脂粉添加到每升液体培养基中，并在121°C下灭菌20分钟[12]。无菌水冲洗桂木根，用无菌水冲洗，切碎，在组织破碎机中加入蒸馏水，搅拌均匀，用四层纱布过滤并将滤液转移到试管中将50 ml，3100 r /离心机离心15分钟;弃去上清液，将沉淀重新溶于50 ml无菌水中，并以3100 rpm离心10分钟，重复3次；弃去上清液，在沉淀中加入5 ml 50％的蔗糖溶液并充分混合。3100 rpm离心10分钟后，小心地将上清液转移至干净的离心管中，加入30 ml无菌水并离心。3100 rpm下旋转10分钟;丢弃上清液，然后将沉淀重新溶解在30 ml中。细菌水以3100 rpm的速度离心10分钟，并将操作重复两次。去上清液，加入无菌水以形成每毫升含2×109孢子的悬浮液，将其保存在4°C的冰箱中直至使用[13]。提取的孢子悬浮液和无菌土壤以1:20的比例均匀混合，以制备每克含1×108孢子的患病土壤，并在黑暗中于24°C的恒温箱中保存48小时[ 14]。
过平板梯度稀释法分离土壤中的微生物：在装有90 ml无菌水的三角烧瓶（300 ml）中称取10 g土壤样品，并在28°C下搅拌以200 rpm的转速旋转30分钟，得到10 -1 g / mL的土壤稀释液，将其连续稀释以产生10-2、10-3、10-4、10-5、10-6和按照上述方法10-7 g / mL的稀释溶液。每种浓度的100μL分散在培养基上，并重复3次。PDA和Gordon No. 1培养基在28°C的培养箱中放置最多4至6天，以分离真菌和放线菌。养LB将底物置于37°C的培养箱中1-2天以分离细菌。个板生长后，将单个菌落移出并重新接种在相应的板上进行分离和纯化。离出的土壤微生物被保存在4°C的冰箱中以备将来使用。用板对板筛选方法。抗真菌筛选方法：取一块在28°C下生长的致病性指示菌饼（直径5毫米）5天，然后将其倒置在PDA培养板（直径9厘米）的中央，并对称地在中心细菌饼的3 cm周长上接种分离的真菌饼（直径5 mm）；拮抗细菌和放线菌的筛选方法：取在28°C下恒温生长5天的病原体指示菌（直径5 mm）滤饼，然后将其倒置接种在PDA培养板上（直径9厘米）在中心，在28°C下培养2天，然后在距细菌中心饼3厘米的圆周上对称接种细菌或放线菌。包含致病性指示菌的平板用作对照，在28°C下培养3个重复样品。对照被平板入侵时，计算出抑菌水平[15]。活选定的生物对照细菌，并将其插入液体培养基中。菌在LB液体培养基中生长，并在37°C和200 rpm的振荡器上生长1天。于蘑菇的PDA液体培养基为28℃和180r /。摇床上进行培养4天，历时4分钟，并且在28℃，180rpm的摇床上培养放线菌。来自高的1号液体培养基上放置6天。滤8层无菌纱布，将滤液以8000rpm离心20分钟，上清液为生物防治代谢物。4 ml先前准备的根瘤菌孢子悬浮液和等体积的生防代谢物上清液，并在灭菌的15 ml离心管中混合，将空白培养基和根瘤菌孢子混合作为对照。
本文转载自
桂花树价格 https://www.guihua1998.com
首页
短信
