桂花苗价格(小檗碱与多种成分复配及其对桂花灰霉病的抑制作用)

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目录：
1、复配作用山药根是国槐的干燥根茎
2、小檗碱作用以前的研究发现
3、多种成分复配作用通过将小檗碱与槐根
4、及其作用小檗碱（BBR
5、与作用设定了小檗碱等成分的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度
6、桂花苗价格除小檗碱外
7、成分复配作用因此
　　灰霉病是由灰葡萄孢菌侵染所致的真菌性植物病害,引起桂花、黄瓜、葡萄等果蔬叶子和果实的腐烂,继而造成果蔬的腐烂枯死,对抑制作用的严重影响这些经济作物的产量。

目前防治灰霉病以三唑类、吡咯类、嘧啶胺类、甲基硫菌灵、异菌脲等化学药剂为主。

化学药物不仅作用靶点单一,且药物残留对环境和人体都有巨大的危害。

近年来,对抑制作用灰霉病寻找合适的生物源杀菌剂和生防菌、减少环境污染、确保食品安全是农药研究的重点。

小檗碱作为传统治疗肠胃炎的中药成分,桂花苗价格广泛存在于黄连、黄柏等植物中,来源丰富,桂花对抑制作用灰霉病小檗碱作用价格低廉。

　　

复配作用山药根是国槐的干燥根茎

　　山豆根是越南槐的干燥根茎,主要成分为生物碱、黄酮、皂苷类物质,常用于治疗咽喉肿痛、火毒蕴结;炉甘石是一种主要成分为碳酸锌的复杂矿物集合体,具有解毒明目退翳,及其作用收湿止痒敛疮等功效;芸薹素内酯是一种广谱植物生长调节剂,能提高农作物的抗病性缓解药害;复硝酚钠是一种集营养、调节、预防为一体的植物生长调节剂,复配作用可与其他抑菌成分复配使用从而提高药效。
　　

小檗碱作用以前的研究发现

　　前期研究发现,小檗碱对桃褐腐病菌、苹果轮纹病菌和灰霉病菌(即灰葡萄孢菌)防效好。然而在实际生产上不可能仅使用一种杀菌剂。本试验对小檗碱与山豆根、炉甘石、芸薹素内酯、复硝酚钠复配的相容性进行了研究,结果发现,成分复配作用桂花苗价格山豆根、炉甘石、芸薹素内酯、复硝酚钠单独使用对桂花灰霉病菌有抑制作用,但最小抑菌浓度和最小杀菌浓度均较大。
　　

多种成分复配作用通过将小檗碱与槐根

　　通过探究小檗碱分别与山豆根、炉甘石、云薹素内酯、复硝酚钠复配对桂花灰霉病菌的抑制作用,以期为小檗碱的研究和指导生产提供理论依据。
　　

及其作用小檗碱（BBR

　　小檗碱(简称BBR,97)购自陕西慧科生物发展有限公司,山豆根、炉甘石购自长安中药材有限公司,0.1%芸薹素内酯、0.2%复硝酚钠购自河南神雨生物科技有限公司,10%小檗碱可湿性粉剂(自制。PDA培养基:新鲜去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15g,加去离子水定容至1000mL,分装10瓶待用。将小檗碱与其他成分母液稀释为一系列浓度,按照表1比例分别加入经115℃灭菌25min后冷却至55℃左右的PDA培养基中,制成系列浓度含成分PDA平板,以加无菌水为空白对照。用直径为8mm的打孔器取在28℃恒温培养箱避光培养3d的灰霉病菌菌饼,接种于含不同成分不同浓度梯度的PDA平板上。将各平板倒置于28℃恒温培养箱内,避光培养,24h后,每隔12h用十字交叉法测量并记录菌落直径。根据桂花灰霉病菌在不同药物梯度平板上的生长速率,计算出小檗碱及其他成分对桂花灰霉病的半最大效应浓度、不同浓度成分对灰霉病的生长抑制率。其中,菌落直径=测量菌落直径平均值-8;抑制率(空白组菌落直径-加药处理组菌落直径/空白组菌落直径×100。
　　

与作用设定了小檗碱等成分的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度

　　小檗碱与其他成分最小抑菌浓度和最小杀菌浓度设置分别含小檗碱、10%山豆根、炉甘石、芸薹素内酯、复硝酚钠的培养基抑制桂花灰霉病菌,将菌饼接种至培养基28℃培养,12h后观察培养基上桂花灰霉病菌菌丝生长情况,无菌丝生长,则该浓度即为MIC值,72h后未见菌丝生长的浓度即为MBC值。小檗碱与其他成分复配根据等效线法,以小檗碱和山豆根为例,抑制作用按照各自EC50的浓度配制母液,复配比例按照表2分别制备含小檗碱和山豆根的PDA培养基,对抑制作用的将8mm的桂花灰霉病菌菌饼接种到培养基表面中央,28℃培养,24h后采用十字交叉法测量菌落直径。采用共毒系数法计算共毒因子,若共毒因子大于20,桂花对抑制作用灰霉病则表示两药之间有协同作用;若共毒因子小于-20,小檗碱作用则表示两药之间有拮抗作用;若共毒因子为-20～20,则表示两药之间作用相加。其中,对抑制作用混剂理论抑制率=小檗碱理论抑制率+其他成分理论抑制率;共毒因子×100。不同成分处理灰霉病菌电镜观察采用"1.2.2"的方法,设置小檗碱和山豆根、炉甘石复配空白对照和EC50对照组,及其作用用玻片覆盖法采集菌丝,将均匀长着灰霉病菌丝的盖玻片,用1%戊二醛溶液固定12h,对抑制作用的然后用0.15%戊二醛冲洗;用10、30、50、70、90%乙醇溶液梯度洗脱5min,成分复配作用100%乙醇溶液洗脱10min,充分脱水;真空冷冻干燥;将样品固定到样品台,桂花苗价格喷金,桂花对抑制作用灰霉病多种成分复配作用扫描电镜观察。小檗碱与不同成分复配对灰霉病的田间防效试验田间试验设在北京市密云桂花种植基地日光室,品种为原味。试验时间为2016年3月10日至5月12日。田间防治用清水处理作为对照;每个浓度4次重复,对抑制作用共20个小区,随机排列,每小区500株。施药时间为3月18日、3月29日、4月10日、4月25日,及其作用共计施药4次。最后一次施药10d后调查灰霉病病果率,计算防效。桂花灰霉病的分级标准及药效计算方法按照《农药田间药效试验准则》进行,记录病果个数。病果分级采用如下标准:0级,无病斑;2级,成分复配作用与作用残留花瓣发病或柱头发病;3级,萼片腐烂或柱头发病蔓延到果脐部;5级,多种成分复配作用果脐部有浸润斑但无霉层;7级,果脐部有霉层但未扩展到其他部位。药效计算方法:病果率(病果数/调查果数×100,防治效果×100。用SPSS进行数据处理,所给出的数据均是平均值±标准差;OriginPro9.1绘图。由表3可知,小檗碱抑制桂花灰霉病菌的EC50为0.311mg/mL,MIC为3.25mg/mL,MBC为6.50mg/mL;10%山豆根对桂花灰霉病菌的EC50为22.570mg/mL,MIC为150.00mg/mL,MBC为275.00mg/mL;炉甘石对桂花灰霉病菌的EC50为0.908mg/mL,多种成分复配作用MIC为9.25mg/mL,MBC为18.75mg/mL;芸薹素内酯对桂花灰霉病菌的EC50为6.292mg/mL,MIC为50.00mg/mL,MBC为125.00mg/mL;复硝酚钠对桂花灰霉病菌的EC50为2.113mg/mL,MIC为25.00mg/mL,对抑制作用的MBC为100.00mg/mL。
　　

桂花苗价格除小檗碱外

　　除小檗碱外,其他成分的MIC值与MBC值均偏大,故考虑与其他成分复配使用。小檗碱与其他成分复配对桂花灰霉病的抑制效果由图1、图2可知,对抑制作用灰霉病小檗碱与炉甘石复配对桂花灰霉病菌有很强的抑制作用,通过空白组(对照)与试验组对比发现,小檗碱作用0.1555mg/mL小檗碱+0.0625mg/mL炉甘石在菌落生长的各个阶段抑菌效果最好,桂花对抑制作用灰霉病抑菌率超过50,但试验中发现,炉甘石的溶解性差,及其作用其溶解于培养基的具体浓度并未检测出。与对照相比,小檗碱与10%山豆根复配对桂花灰霉病菌生长有一定抑制作用;小檗碱与芸薹素内酯复配对桂花灰霉病菌生长有促进作用;小檗碱与复硝酚钠复配也有促进桂花灰霉病菌生长的现象。根据"2.2"试验结果,抑制作用选择了复配成分对灰霉病菌抑制效果较好的小檗碱和山豆根,复配作用并对其药效进行了评价。从表4可以看出,小檗碱与10%山豆根按9a/10+b/10复配时,共毒因子大于20,对抑制作用灰霉病成分复配作用表明在该复配比下有协同增效作用;按8a/10+2b/10、2a/10+8b/10和a/10+9b/10复配时,共毒因子为20-20,桂花对抑制作用灰霉病桂花苗价格说明在该复配比下小檗碱和10%山豆根之间有相加作用;其他配比情况下,共毒因子小于-20,表示复配的小檗碱和10%山豆根之间有拮抗作用。
　　

成分复配作用因此

　　因此,小檗碱与10%山豆根的最佳复配为9a/10+b/10,及其作用即0.280mg/mL小檗碱+2.257mg/mL10%山豆根。由图3可知,与处理组相比,正常生长的菌丝平滑、丰满、粗细均匀。小檗碱与山豆根、炉甘石处理后,复配作用菌丝多出现缠绕扭曲,菌丝表面出现断裂、干瘪、褶皱、塌陷等粗细不均的形态,成分复配作用菌丝萎缩脱水严重,部分菌丝甚至出现溶解断裂。基于这些成分处理后菌丝呈现异常的形态变化,桂花苗价格表明小蘖碱与山豆根、炉甘石复配对桂花灰霉病有强烈的抑制作用。由表5可知,多种成分复配作用对照的病果率为31.6。10%小檗碱可湿性粉剂1000倍稀释液单独使用防效71.7,小檗碱与山豆根、炉甘石、复硝酚钠、芸薹素内酯合用均能增加小檗碱对桂花灰霉病的防效。在实验室培养桂花灰霉病的情况下复硝酚钠、芸薹素内酯均能不同程度促进病原菌生长。结果表明,小檗碱与山豆根、炉甘石复配无论是菌体还是活体均可起抑制作用;在活体试验中,小檗碱与复硝酚钠、芸薹素内酯复配使用可增加复配成分对桂花灰霉病菌的防效,实验室平板试验反而促进桂花灰霉病菌的生长。复硝酚钠、芸薹素内酯作为新型绿色环保植物生长调节剂,在活体状态下可促进蔬菜、瓜类、水果等作物生长,改善品质,提高产量,说明小檗碱可与复硝酚钠、芸薹素内酯同时使用,小檗碱与不同成分复配不仅通过抑制菌体生长来起到抑菌效果,与作用有可能通过其他间接作用于活体。本研究采用共毒因子法发现小檗碱和山豆根复配最优配比为0.2799mg/mL小檗碱+2.257mg/mL10%山豆根,此时共毒因子为33,具有协同增效的作用。山豆根主要活性成分为生物碱类、黄酮类、三萜皂苷类,蔡锦源等发现其有很好的抗氧化及抑菌活性。通过电镜观察,推测小檗碱和山豆根复配使用的抑菌机理可能是损坏了菌体的细胞膜,导致细胞凹陷胞内物质外泄,扭曲折断无法正常代谢。炉甘石主要成分为碳酸锌、氧化钙,很多研究发现其有收湿敛疮等功效,然而炉甘石的水溶性较差影响其功效的发挥。通过电镜观察,小檗碱作用推测小檗碱和炉甘石复配使用的抑菌机制可能是收敛了真菌细胞的水分,导致细胞缺水无法进行正常的生长代谢,从而干瘪、脆弱易断。目前,关于植物源农药抑菌机制的报道还很少。后期会在寻找广谱抑菌物质的同时探索药物作用靶点,以期为这些成分单独使用或复配提供适宜、快速的理论指导。