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桂花苗价格-HPLC法测定桂花酱中八氢桂花红素的含量

2022-08-06 01:18:52

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现有研究表明,加工桂花中主要的保健功能性成分为类胡萝卜素。

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八氢桂花红素测定含量的类胡萝卜素可以预防前列腺癌

　　类胡萝卜素可以预防前列腺癌、乳腺癌及消化道器官包括结肠、直肠、胃的癌变,并可降低皮肤癌与膀胱癌的发病率,同时可以预防和治疗心脑血管、动脉硬化等疾病,增强机体免疫功能和抗衰老等重要作用。

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桂花中主要的类胡萝卜素为桂花红素和八氢桂花红素,早在1982年就有报道八氢桂花红素的抗癌作用。

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八氢桂花红素对皮肤癌具有预防作用,中八氢桂花红素测定含量能抑制乳腺癌细胞的分化和癌症的发生,控制癌症的发展,能有效清除体内的自由基,抑制LDL的氧化,阻止紫外线对皮肤的损伤和抑制皮肤癌的发生,以及保护DNA免受损伤等作用。

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但是目前对八氢桂花红素的研究远远没有桂花红素研究的深入,桂花酱中八氢桂花红素测定含量关于采用HPLC法测定八氢桂花红素含量的研究更是鲜有报道。

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笔者以HPLC法测定桂花主要产品桂花酱中八氢桂花红素的含量,以期为桂花的开发利用提供理论依据。市售某品牌桂花酱,八氢桂花红素测定含量的购自新疆石河子市。Shimazu高效液相色谱仪,配有ShimazuLC20AT四元泵,测定含量桂花苗价格CMB20A控制器,SPD20A紫外检测器,SIL20A自动进样器,CTO10As柱温箱,HPLC法测定LCSolution工作站。八氢桂花红素对照品为石河子大学药学院实验室通过液相制备纯化(面积归一法纯度>99,通过1HNMR和质谱、UV光谱确定为八氢桂花红素;甲醇、四氢呋喃为色谱纯,购自Sigma公司;水为重蒸馏水;其他试剂为分析纯,购自天津富宇有机精细化工有限公司。
　　

桂花苗价格色谱柱为AgilentATC18

　　色谱柱为AgilentATC18,流动相为甲醇THF,流速为1ml/min,测定含量温度为30,检测波长287nm,该波长为八氢桂花红素的最大吸收波长,桂花苗价格进样量为50μl,中八氢桂花红素测定含量理论板数按八氢桂花红素峰计算不低于3000。
　　

中八氢桂花红素测定含量精密称取真空干燥后的八氢桂花红素对照品0.93mg溶解于丙酮中

　　精密称取真空干燥后的八氢桂花红素对照品0.93mg溶解于丙酮中,定容至10ml,此时标准液的浓度为93μg/ml。经微孔滤膜滤过,HPLC法测定滤液作为对照品溶液备用。精密称取桂花酱约1g,八氢桂花红素测定含量HPLC法测定精密称重1.00574g,置50ml容量瓶中,桂花酱中八氢桂花红素测定含量加入丙酮适量,桂花酱中八氢桂花红素测定含量超声提取15min,将上清液吸入另一个50ml容量瓶,多次,测定含量桂花苗价格至最后上清液及桂花酱均接近无色,用丙酮定容至50ml,摇匀,微孔滤膜过滤即得。
　　

HPLC法测定取制备的对照品和供试品溶液

　　取制备的对照品和供试品溶液,HPLC法测定按"1.2.1"色谱条件进行测定,考察系统的适应性。分别精密量取2、4、6、8、10、12μl对照品溶液,注入高效液相色谱仪中,测定,八氢桂花红素测定含量以对照品量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,建立标准曲线。取"1.2.2.2"中供试样品溶液,连续进样6次,每次50μl,记录峰面积,并计算RSD。取同一批样品提取的提取液,分别于0、2、4、8、12、18、24h进行测定,计算RSD。取同批次样品6份,按照"1.2.2.2"方法制备供试品溶液,八氢桂花红素测定含量HPLC法测定按样品分析方法测定峰面积,计算RSD。分别取该品6份,精密称定每份0.5g,桂花酱中八氢桂花红素测定含量置于6个50ml的容量瓶中,加入含八氢桂花红素510μg的八氢桂花红素对照液,按"1.2.2.2"项下方法制备供试品溶液,按"1.2.1"项下的色谱条件测定,测定含量桂花苗价格进样量为50μl,计算平均回收率和RSD。
　　

八氢桂花红素测定含量精密吸取按1.2.2.2方法制备的供试品溶液

　　精密吸取按"1.2.2.2"方法制备的供试品溶液,进样50μl,按"1.2.1"项下的色谱条件进行测定。系统性试验试验得出,对照品保留时间为11.8min,样品中的八氢桂花红素与其他各峰之间分离良好(图。试验计算得回归方程为Y=352934x-1626.7,结果表明八氢桂花红素在0.186～1.116μg范围内线性关系良好。试验测定并记录峰面积,计算得RSD为0.66,表明仪器精密度良好。试验计算RSD为0.78,结果表明该样品在24h内稳定性良好。试验计算得RSD为2.56,表明重现性良好。试验计算得到平均回收率为103.8,RSD为1.47(表;加样回收率试验合格。
　　

桂花酱中八氢桂花红素测定含量样品的含量测定取1.2.2.2中桂花酱提取液50μl(经0.22μm滤膜过滤

　　样品的含量测定取"1.2.2.2"中桂花酱提取液50μl(经0.22μm滤膜过滤,平行进样3次,按外标法计算样品中八氢桂花红素的含量,用以上方法测得市售某品牌桂花酱中八氢桂花红素的含量为107.0mg/kg。目前关于桂花中八氢桂花红素的含量测定鲜有报道,试验为进一步研究桂花中八氢桂花红素的含量测定提供了依据。因为八氢桂花红素为脂溶性色素,可溶于其他脂类和非极性溶剂,不溶于水,曾选用正己烷、正戊烷和丙酮作为浸提剂,结果发现正己烷和正戊烷对八氢桂花红素几乎没有提取,桂花酱中八氢桂花红素测定含量而丙酮作为浸提剂溶解色素的能力较强,易于回收,八氢桂花红素测定含量的所以最后选用丙酮作为提取剂。用高效液谱法测定桂花样品时,流动相曾选甲醇∶乙腈,桂花苗价格所得色谱峰严重拖后,在60min内,桂花红素及八氢桂花红素均不出峰。选用甲醇∶乙腈,能观察到桂花红素及八氢桂花红素色谱峰,但保留时间过长,不符合含量测定快速的要求;选四氢呋喃∶乙腈,八氢桂花红素出峰时间为11.8min,且达到基线分离。所以最后选定25%四氢呋喃∶75%乙腈作为流动相。