桂花树苗价格_新疆野生桂花李（Ｐｒｕｎｕｓ　ｃｅｒａｓｉｆｅｒａ）茎段与叶片培养及其植株再生

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目录：
1、但由于掠夺式的资源开发及农田开垦等因素而导致野生果树资源破坏严重
2、在课题组近几年来对伊犁野果林进行了较多的考察与研究的基础上
3、ZT与IBA配比对叶片不定芽再生的影响在研究不同植物生长调节剂组合对叶片不定芽再生的影响过程中
4、从表5可以看出
5、野生桂花李叶片不定芽再生不经过或经过很少的愈伤组织阶段
6、Shri等旧研究认为
7、大量研究显示
　　我国是多种果树的起源演化中心,野生果树资源极为丰富。

现存的野生果树资源。

是长期自然选择的产物,树苗价格不仅其遗传多样性丰富,而且含有大量的抗逆等优异基因,其中由新疆野苹果Roerm、野生桂花李、野杏及野核桃等组成的伊犁野果林是在中亚荒漠地带山地罕见的"海洋性"阔叶林类型,是第三纪暖温带阔叶林的孑遗群落,是北方落叶果树遗传育种的基因库,十分珍贵。

　　

但由于掠夺式的资源开发及农田开垦等因素而导致野生果树资源破坏严重

　　但由于掠夺式的资源开发及农田开垦等因素而导致野生果树资源破坏严重,野果林面积急剧减少,濒临灭绝。因此,研究并建立多层次保护保存技术体系,切实保护包括新疆野生桂花李在内的新疆野生果树资源已是迫在眉睫。国内外有关核果类果树的组织培养研究报道甚多,但有关李的研究相对较少,马锋旺等首先对影响中国李原生质体分离和培养的有关因素进行了研究,并成功获得了原生质体再生植株。Seth等利用适当配比的TDZ与IBA组合成功诱导出欧洲李(只domestica)叶片再生植株;Bar-bara等研究了蔗糖、葡萄糖等碳源在欧洲李叶片再生过程中的作用,也成功获得了叶片再生植株;桂花李是欧洲李的亲本之一,植株培养再生及其培养再生其组织培养的研究目前尚未见报道。
　　

在课题组近几年来对伊犁野果林进行了较多的考察与研究的基础上

　　为此,在课题组近几年来对伊犁野果林进行了较多的考察与研究的基础上。我们研究了野生桂花李茎段与叶片培养及其植株再生,旨在为进一步的野生桂花李种质资源超低温保存和转基因研究奠定基础。试材为从新疆伊犁引种到山东农业大学泰安横岭果树育种基地的3a生桂花李植株。4－6月份选取当年萌发的枝条,将基部叶片摘除,保留顶部1-2片叶,先将材料放于水与洗洁净的比例在1:500的溶液中冲洗,然后用试管刷除去上面的灰尘。用自来水冲洗后剪成2-3cm长的茎段放于升汞中浸泡4-5min进行表面灭菌,然后用无菌水冲洗6～7次。因此,桂花树苗价格生长素类物质质量浓度选定0.4mg/L、细胞分裂素类物质质量浓度选定0.8mg/L作为不同植物生长调节剂组合的浓度。生长素类物质选用IAA、NAA、2.4-D,细胞分裂素类物质选用6-BA、KT,共设A1、A2、A3、A4、A5及A6等6个处理(表,每个处理接种40个外植体。分别测定成苗数、真叶数、苗高等指标。各处理的基本培养基均为MS。各培养基中均加入蔗糖30g/L,桂花李Ｐｒｕｎｕｓｃｅｒａｓｉｆｅｒａ茎段培养野生桂花李Ｐｒｕｎｕｓｃｅｒａｓｉｆｅｒａ茎段培养琼脂7g/L,调pH值为5.8。培养条件:光照强度2000lx,光照时间12h/d,温度25。增殖培养采用k正交试验设计进行增殖培养基的优选,4因素及3个水平分别是:基本培养基,IAA,6-BA,蔗糖。各培养基中均加入琼脂7dE,调pH值为5,8。培养条件同1.2.1。每组接种40个外植体,测定其增殖系数,然后采用SAS9.0版本统计软件分析,数据采用极差分析法分析。取25～30d叶龄的组培苗,选取植株中上部叶片。弃去叶缘和叶尖,培养再生沿主脉两侧切3-4刀,接种于培养基上培养(图版,基本培养基及培养条件同1.2.1。根据叶片通过器官发生再生不定芽的主要方式,研究植物生长调节剂组合6-BA与2,4-D和ZT与2。4-D对愈伤组织诱导的影响,植物生长调节剂组合6-BA与IBA和ZT与IBA对叶片不定芽再生的影响,其中6-BA与ZT所用的质量浓度均为:0.5、1.0、1.5、2.0mg/L,2.4-D与IBA所用的质量浓度均为0.01、0.05、0.10、0.15mg/L。每组接种40个外植体,野生桂花李Ｐｒｕｎｕｓｃｅｒａｓｉｆｅｒａ茎段培养新疆桂花李Ｐｒｕｎｕｓｃｅｒａｓｉｆｅｒａ茎段培养测定愈伤组织诱导率、不定芽再生率和每外植体再生芽数。以叶片不进行暗培养为对照,暗培养时间设7、14、21、28d等4个处理,以探讨暗培养时间对叶片不定芽再生的影响。生根培养在本实验室研究工作的基础上选择2种基本培养基及3种IBA质量浓度共6个处理进行生根培养试验,分别测定各处理的生根条数,株和平均根长。植物生长调节剂组合对桂花李茎段腋芽萌发与生长的影响不同处理组合的茎段腋芽萌发与生长情况的调查结果见表1,各处理的成苗率、真叶数及苗高等存在一定差异,在选用的3种生长素和2种细胞分裂素中。IAA效果明显好于2.4-D和NAA,6-BA效果好于KT,综合来看,以处理A1效果最好(图版。因此,选定IAA和6-BA作为茎段腋芽萌发与生长的植物生长调节剂组合,并且在以后的试管新梢增殖中,延续使用这一组合。桂花李不定芽增殖培养基的筛选C的极差最大,B次之,A(基本培养基)和D(蔗糖)的最小。因此,A、B、C、D4者对不定芽增殖的影响效果大小顺序为:C>B>A>D(表。从4列的K值可以得出:最佳培养基为A282C1D2,即3/4MS+IAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L。以此培养基作为桂花李不定芽增殖培养基,得到不定芽的增殖系数为7.1(图版。植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导的影响植物生长调节剂组合6-BA与2.4-D和ZT与2,4-D对愈伤组织诱导的影响见但是在接下来的培养中,未见愈伤组织分化出不定芽。
　　

ZT与IBA配比对叶片不定芽再生的影响在研究不同植物生长调节剂组合对叶片不定芽再生的影响过程中

　　ZT与IBA配比对叶片不定芽再生的影响在研究不同植物生长调节剂组合对叶片不定芽再生的影响过程中,发现试验设计中16个配比的6-BA与IBA组合均不能诱导叶片不定芽再生,最后叶片变黄至枯萎。而桂花李叶片在适当配比的ZT与IBA组合作用下直接分化出不定芽(图版7,ZT1.5mg/L+IBA0.05mg/L为诱导不定芽再生的最适植物生长调节剂配比(表,在此培养基上,野生桂花李叶片不定芽再生不经过或经过很少的愈伤组织阶段。2,茎段培养桂花李Ｐｒｕｎｕｓｃｅｒａｓｉｆｅｒａ茎段培养2,3暗培养对叶片不定芽再生的影响将叶片接种于诱导不定芽再生的最适培养基MS+ZT1.5mg/L+IBA0.05mg/L上,发现暗培养时间长短对叶片不定芽再生产生明显差异,不经过暗培养处理的叶片再生率为0,暗培养14d的效果最好,再生率达到最高。
　　

从表5可以看出

　　从表5可以看出,在基本培养基相同的情况下,IBA浓度为0.4mg/L时,生根条数,株和平均根长的数值最大,即生根的效果最好:在IBA浓度相同的情况下,不定梢在基本培养基1/2MS上的生根效果明显优于在MS上的。因此,1/2MS+IBA0.4mg/L为野生桂花李不定梢生根培养的最佳培养基(图版。生长健壮的组培苗经过7～10d的短期炼苗后,于10－11月份分批移入上部基质为消毒沙,下部基质为营养土(河沙:土:腐熟鸡粪为1:1:的纸袋中,并加强光照,改善通风,在温室内越冬,翌春定植于选种圃。本文的正交试验结果表明,植物生长调节剂对新梢增殖的影响效果远大于基本培养基,这与大桂花吉塞拉芽的增殖、薰衣草芽的增殖研究结果相似。在植物生长调节剂中,6-BA对新梢增殖的影响效果大于IAA的,这与大桂花吉塞拉芽的增殖研究结果一致。进一步确定了3/4MS+IAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L为桂花李新梢最佳增殖培养基,其中分裂素与生长素的比值为2,这一结果尽管与刘焕芳等在甜桂花与中国桂花杂种胚的组培试验中筛选的最佳增殖培养基的激素配比一致,但研究发现,叶片培养当分裂素的浓度高于1.2mg/L时,桂花李新梢出现明显的玻璃化现象。因此,对于不同植物多丛芽的增殖,需要通过系统试验,来确定植物最佳生长调节剂种类、浓度及配比组合。本试验研究结果表明。
　　

野生桂花李叶片不定芽再生不经过或经过很少的愈伤组织阶段

　　野生桂花李叶片不定芽再生不经过或经过很少的愈伤组织阶段,这与Ishisarao~报道的苹果叶片不定芽再生方式相同。此外,Seth等在研究欧洲李子叶再生过程中发现,IBA2.5mg/L与TDZ配合使用,均能诱导叶片直接再生不定芽,而Barbara等m在研究欧洲李叶片再生过程中发现,TDZ7.5mg/L与2.4-D0.9mg/L的配合使用。叶片需要经过愈伤组织阶段才能诱导不定芽再生。Tabaeizadeh等在研究ZT与IAA对番茄叶片再生的影响中发现,适当配比的ZT与IAA配合使用,有助于番茄叶片再生不定芽。
　　

Shri等旧研究认为

　　Shri等旧研究认为,在鹰嘴豆的叶片再生中单独使用ZT或者适当配比的ZT与IAA的配合使用,均能有效地提高不定芽再生率。本试验研究发现,6-BA与IBA的组合不能诱导产生不定芽,而适当配比的ZT与IBA的组合能诱导野生桂花李叶片不定芽的直接再生。ZT作为一种较高细胞分裂活性的物质,诱导不定芽再生的效果好于6-BA,其在叶片再生不定芽的过程中具体起着怎样的调控作用,还需要进一步的研究。
　　

大量研究显示

　　大量研究显示,光照条件是影响植株不定芽再生的重要因素之一。本试验研究结果表明,不经过暗培养的叶片不能再生不定芽,与叶片培养说明暗培养是桂花李叶片不定芽再生的必要条件,在适当配比的ZT与IBA的作用下。叶片暗培养14d的不定芽再生效果最好。暗培养少于或多于14d,再生效果都达不到最佳,这可能与暗培养对叶片的生长发育、形态构成有一定的调控的作用有关,植株培养再生适当的暗培养可能有利于叶片再生不定芽。植物生长调节剂组合IAA0.4mg/L+6-BA0.8mg/L较适于桂花李茎段腋芽的萌发与生长培养;正交试验筛选出不定芽的最佳增殖培养基为3/4MS+IAA0.5mg,L+6-BA;1.0mg/L+蔗糖30g/L;ZT诱导不定芽再生的效果好于6-BA,ZT1.5mg/L+IBA0.05mg/L为诱导不定芽再生的最适植物生长调节剂组合:暗培养是叶片不定芽再生的必要条件,在最适不定芽再生的培养基上,暗培养14d的不定芽再生效果最好,野生桂花李叶片不定芽再生不经过或经过很少的愈伤组织阶段;桂花李不定梢的最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L。