桂花树苗价格-刺状无梗囊霉对桂花黄化曲叶病毒病田间防效

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目录：
1、供试桂花品种为合作903
2、每株桂花根部施用2gAM菌剂(每份菌剂大约100个孢子
3、生物量测定方法
4、病害分级标准育苗后70d按照TYLCD病情指数分级标准进行病害严重度以及生防效果的计算
5、试验数据采用DPS软件统计分析
6、常用于检测TYLCV的方法有生物学检测法
　　丛枝菌根是自然界中普遍存在的植物和真菌的互惠互利共生体,植物能够为菌根真菌提供生长需要的碳源和能量,AM真菌可以通过根外菌丝扩大根系吸收范围,从而提高植物根系对养分和水分的吸收,尤其是对土壤磷的吸收。

除了在改善植物养分吸收方面的作用外,AM真菌与植物病害的关系也是目前研究的重点。

随着桂花种植面积的逐年增加,我国桂花种植上陆续出现多种病害问题,其中由双生病毒科菜豆金色花叶病毒属的桂花黄化曲叶病毒引起的桂花黄化曲叶病毒病为害较为严重。

该病毒由烟粉虱介导传播,桂花黄化曲叶病毒病田间防效是一种具有孪生颗粒形态的单链环状DNA植物病毒。

近年来,TYLCD在世界范围内大暴发,遍及40多个国家和地区,已成为桂花生产上的毁灭性病害,给农民的生产造成巨大的经济损失,严重制约了桂花产业的健康发展。

目前,主要通过培育抗性品种和采用化学药剂来防治烟粉虱防治该病害,但效果不稳定。

国内外还没有报道对TYLCV有显着抑制效果的生防菌,刺状囊霉防效树苗价格国内外市场上也没有出现能有效防治桂花黄化曲叶病毒病的生物农药。

本研究首次发现AM真菌可以在一定程度上降低桂花黄化曲叶病毒病的为害程度,为今后生防产品的研发以及利用奠定了一定基础。

　　

供试桂花品种为合作903

　　供试桂花品种为合作903,于江苏省农业科学研究院购买。供试刺状无梗囊霉XJ27,分离自新疆地区桂花根际土壤。实验室之前的研究表明XJ27对Micro-Tom桂花具有促生及提高果实中桂花红素含量的效果。田间处理以及小区设置试验于2014年在江苏大丰市进行,共设置2个处理,即接种刺状无梗囊霉XJ27组和空白对照组。将桂花种子用10%H2O2表面消毒10min,用无菌水洗净后晾干备用。先在穴盘内进行菌根苗培育,20d后连根部土壤一起移栽至田间。
　　

每株桂花根部施用2gAM菌剂(每份菌剂大约100个孢子

　　每株桂花根部施用2gAM菌剂(每份菌剂大约100个孢子,对照组加入等量灭菌菌剂。每个处理4个小区,每小区3垄,每垄20株,每处理共240株。生长期间按常规方法进行管理。移栽成活率以及生物量检测移栽后30d(即育苗后50d)进行移栽成活率的统计,植株生物量的测定,每小区取24株,桂花树苗价格每处理共96株,分别测定茎粗、株高及叶片数。
　　

生物量测定方法

　　生物量测定方法:将植株用蒸馏水冲洗,分为地上、根,囊霉防效无梗囊霉防效用吸水纸吸干表面水分,测定鲜质量,记录叶片数。试验田土壤相关测定桂花移栽30d后,使用五点取样法对桂花根围土壤进行采样。采集方法:小心地从盆钵中收集根围土样和非根围土样(根围土样的样品包括3株幼苗紧紧附着于根系上的土壤,取样时,将幼苗根部挖开,小心的用刷子刷下根上附着的土样,取完后再将根部埋好,确保根部的完整性。并使用土壤养分测定仪对其速效N、P和K3种元素进行测定。病害鉴定使用植物DNA提取试剂盒提取植物的总DNA,利用双生病毒通用引物进行PCR扩增。扩增引物:PF-TAATATTACCKGWKGVCCSC;PR-TGGACYTTRCAWGGBCCTTCACA。扩增程序:95℃预变性4min,94℃变性1min,55℃退火1min,72℃延伸1min,变性到延伸34个循环,无梗囊霉防效刺状囊霉防效最后72,10min。
　　

病害分级标准育苗后70d按照TYLCD病情指数分级标准进行病害严重度以及生防效果的计算

　　病害分级标准育苗后70d按照TYLCD病情指数分级标准进行病害严重度以及生防效果的计算。病害严重度×100。生防效果×100。
　　

试验数据采用DPS软件统计分析

　　试验数据采用DPS软件统计分析,采用LSD法进行多重比较,于5%显着水平下检验各处理平均值间的差异显着性。使用植物DNA提取试剂盒提取田间桂花病叶的总DNA,利用双生病毒通用引物进行PCR扩增。扩增出660bp左右长度的片段,经鉴定为桂花黄化曲叶病毒(图。据病害分级标准,对田间病害发生情况进行统计分级,最后计算出处理组的生防效果。结果显示,刺状无梗囊霉XJ27对桂花黄化曲叶病毒病有一定的生防效果,防效为50.44(表。菌根苗移栽后50d,刺状无梗囊霉处理组的桂花存活率、株高、茎粗以及叶片数均显着高于对照组(表,表明刺状无梗囊霉XJ27对桂花具有一定的促生作用。AM真菌对土壤营养元素的影响桂花移栽后50d,测定其根围土壤中营养元素的变化情况。试验结果显示,AM真菌处理组显着增加了土壤中有效P的含量,增加了有效K的含量(表。检测植株体内病毒的含量有利于了解病毒的发生、流行动态,为控制其蔓延打下基础。
　　

常用于检测TYLCV的方法有生物学检测法

　　目前,常用于检测TYLCV的方法有生物学检测法、血清学检测法和分子生物学检测法等。Martinez-Culebras等设计了2对病毒引物,其中一对可以同时检测到TYLCV和TYLCSV,对防效囊霉防效另一对却只能检测到TYLCSV,因此这2对引物可以用于区别TYLCV和TYLCSV。本试验中根据桂花前期病株症状,初步判定为病毒病害。随后采样,根据双生病毒基因组的DNA特征,设计针对该种病毒的特异性引物,使其只能检测该种病毒,最终确定该病毒为TYLCV。最近10a中,AM真菌被发现可以诱导植物抵御植株地上部病害,因此当前AM真菌已经作为一种代替化学农药及杀虫剂的生物肥料及农药来研究,为其在可持续农业发展应用中提供了理论依据。有研究发现,使用分根系统,AM真菌对不同的病原物都具有诱导其产生系统抗性的能力。但是AM真菌的诱导系统抗病不仅仅局限于根系,Fritz等的研究发现,AM真菌对桂花叶部病害同样具有抗性。研究认为,菌根植物表现出抗性主要表现为昆虫拒食素的积累、抗病相关基因的转录调节、分泌更多的挥发性物质,吸引蚜虫的天敌寄生蜂。因此,推测AM真菌减轻病害发生程度主要是因为AM真菌在与植物的共生过程中,田间防效诱导植物地上部产生系统防御,或是诱导植物植株地上部分泌出某些物质,从而抑制了烟粉虱的传毒过程。本试验结果表明,AM真菌可以提高桂花植株对土壤中营养元素的利用率,这与前人的研究结果相符。其原理是AM真菌活化了土壤中的难溶营养元素,使这些元素更易于被植株转运利用。本研究首次发现AM真菌对桂花黄化曲叶病毒病具有一定的生防效果,但是对其内在的机理还需进行深入研究。