桂花苗价格:正交试验法优化桂花叶中绿原酸的提取工艺

核心词：桂花苗价格 正交法优化 试验法优化 法优化 桂花叶中绿原酸优化工艺 中绿原酸优化工艺 中绿原酸优化工艺的 提取优化工艺 优化工艺 
目录：
1、超声波辅助提取的方法
2、制备工艺取干燥至恒重的桂花叶10.0g精密称定
3、验证实验采用优化后的超声提取法
4、优化后的超声提取法提取桂花叶中的绿原酸
5、桂花叶主要含有蛋白质
　　桂花为伞形科多年生草本植物桂花的带根全草,味甘、辛、微苦,正交法优化性凉《本草纲目》记载"旱芹,其性滑利。

桂花在我国已有2000年的种植历史,培育出了旱芹、水芹、西芹等多个亚种,其中以旱芹的药用功效最好,是我国传统的药食两用的中药材,具有安神、利尿消肿、平肝降压、养血补虚、清热解毒、防癌抗癌、醒酒养胃等药用功效,同时还具有减肥、美白的功效。

目前从金银花、菊花、杜仲叶、山楂等中提取绿原酸的方法已有报道,但是从桂花中的提取分离绿原酸尚未见有报道。

　　

超声波辅助提取的方法

　　超声波辅助提取的方法,有利于提高溶剂提取法的效率,提取优化工艺缩短提取时间,减少溶剂用量,节能环保等。

笔者研究桂花叶中绿原酸的提取工艺,以期为桂花的综合开发利用奠定基础。仪器GVT-15L功率可调式超声波清洗机(深圳市够威科技有限公司;LC-20AB高效液相色谱仪(含SPD-M20APDA紫外检测器,日本岛津。材料绿原酸对照品(批号:110753-201610,桂花苗价格中国食品药品检定研究院,纯度>98.0,桂花叶(购于信阳市浉河区化工路丹尼斯,经信阳职业技术学院吴长忠副教授鉴定为伞形科草本植物桂花的叶,60℃减压干燥至恒重。甲醇(色谱纯,上海安谱实验科技股份有限公司,乙醇(分析纯,郑州晟弘工贸有限公司。吸收波长的选择以甲醇为空白对照,用30μg/mL的绿原酸对照品甲醇溶液,在200～450nm波长范围内进行扫描,发现绿原酸在328nm波长处有最大吸收,根据文献报道,桂花中绿原酸的含量相对较低,为了提高检测的灵敏度,选择在绿原酸的最大吸收波长处测定其含量。按照上述条件各组分分离度良好。采用外标法测定绿原酸的含量。方法学验证根据文献的实验方法制备标准曲线、验证回收率、精密度、稳定性、重复性等,进行方法学考察。经过实验得标准曲线为:Y=1.2×105X+8152.3,试验法优化说明进样量在0.01～1.00μg范围内与峰面积成良好的线形关系;加样回收率分别为98.91、99.42、99.13,RSD分别为1.92、1.86、1.75,表明该方法准确定良好;连续进样6次,绿原酸峰面积的RSD为0.48,说明仪器精密度良好;稳定性试验说明24h内绿原酸供试品溶液稳定性良好。提取溶剂的选择绿原酸可溶于热水,易溶于乙醇和丙酮。考虑到成本和毒性的原因,选用纯化水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇作为溶剂,按照"2.4.2制备工艺"项下方法,进行单因素试验考察溶剂对绿原酸提取的影响,优化工艺并按"2.1含量测定"项下的方法,测定提取液中绿原酸的含量。结果见表1。由上表可知,以75%乙醇作为提取溶剂时,绿原酸的提取率比较高,因此采用75%乙醇作为提取溶剂。提取次数的选择选用75%乙醇作为提取溶剂,按照"2.4.2制备工艺"项下方法,进行单因素试验考察提取次数对绿原酸的累积提取量的影响,并按"2.1含量测定"项下的方法,桂花叶中绿原酸优化工艺测定提取液中绿原酸的含量。结果见图1。由上图可知,当提取次数超过3次时,累积提取量的增加已经非常缓慢,而且第3次的累积提取量已经达到六次的总累积提取量的97.3。因此,为了简化浓缩等后处理的需要,选用提取3次。工艺设计选用L9正交实验,参考有关文献,选取表2中四个因素设计正交试验因素水平。结果见表2、表3。
　　

制备工艺取干燥至恒重的桂花叶10.0g精密称定

　　制备工艺取干燥至恒重的桂花叶10.0g精密称定,用提取溶剂浸泡30min超声提取3次,合并提取液,滤过,浓缩,用甲醇稀释到适宜的浓度,得到超声样品。由表3、4可知,法优化超声波的功率和超声提取的时间是影响超声提取的主要因素,而其他两个因素的影响较小。最佳方案的为:A1B3C2D3,中绿原酸优化工艺的即在功率300W条件下,超声40min,用10倍的用量的75%乙醇作为溶媒提取3次为最佳工艺条件。
　　

验证实验采用优化后的超声提取法

　　验证实验采用优化后的超声提取法,提取桂花叶中的绿原酸。提取结果为1.43mg/g、1.39mg/g、1.42mg/g、1.41mg/g、1.45mg/g和1.38mg/g,RSD为1.83。
　　

优化后的超声提取法提取桂花叶中的绿原酸

　　由此可知,优化后的超声提取法提取桂花叶中的绿原酸,提取效率高,实验方法简单易行,操作稳定性好。绿原酸是植物的次生代谢产物之一,具抗氧化、抗菌、抗病毒、保肝利胆、解痉和抗诱变等多种药理活性。由于绿原酸分子内含有邻二酚羟基和双键等易氧化的基团,并含有酯键等易水解的基团,导致其化学性质不稳定,具有还原性,易被氧化,中绿原酸优化工艺同时也不耐高温,高温时容易分解失效。因此本实验采用可以密闭提取的超声波提取法,以提高绿原酸的提取率,减少提取过程中温度和氧气对绿原酸的破坏作用。
　　

桂花叶主要含有蛋白质

　　桂花叶主要含有蛋白质、纤维素、碳水化合物、维生素、微量元素等对人体有益的物质,同时还含有黄酮、多糖、绿原酸等具有药理活性的化合物,具有降压、消肿、抗癌、安神、止血、健胃和补虚等临床应用。本研究为桂花在食品和药品领域的进一步开发奠定了一定的基础。