桂花抗枯萎病品种的组织病理学研究

　　不同的抗性选择桂花中农13号（抗性）和中农6号（有义）作为试验材料。根浸法进行接种，通过电子显微镜和石蜡切割法观察感染前后的根茎组织结构的变化。

　　果表明，抗病品种有环型和交联型两种，表皮较厚，易感品种有1种环型通道，无表皮。种后，抗病品种的细胞壁增厚，导管腔内出现褐色物体，细胞壁涂层和侵袭者。感品种仅具有细胞壁和加厚的cas体。于病原体的感染，抗病品种具有不同程度的响应，而抗病品种比易感品种具有更早，更强的响应。萎病是一种血管疾病，是影响桂花生长的主要土壤传播疾病之一。发生率为10％至30％，严重疾病年份可达80％至90％，病原体为尖孢镰刀菌（Cu.cum-cumerinum Owen），在中国最受欢迎的菌株是生理小种4。起这类疾病的镰刀菌是土壤的习性，孢子的胚芽管或菌丝体通过根毛或根伤口侵入植物。子感染足以将病原体引入植物。宿主植物疾病的抗性分为两个方面：组织结构抗性和生理生化抗性。组织结构疾病的抵抗力涉及利用组织和结构的特征来防止病原体的接触，入侵和扩展。该实验中，用尖孢镰刀菌f（Fusarium oxysporum f）接种了桂花的不同抗性品种。Sp。

　　讨组织结构方面宿主植物的抗性机制。试的桂花是中农13号（抗性）和中农6号（敏感）。子由哈尔滨农业大学提供。孢镰刀菌在东北农业大学实验实践基地从温室的桂花枯萎病菌株中分离出黄瓜。
　　关细菌病原菌的分离，纯化，培养和孢子悬液的制备，请参见王功臣和方中达的方法。所测试品种的种子在表面上灭菌并播种在灭菌沙箱中，出苗后，按照日本配方Yamazaki施用营养液。成为Ca（NO3）2·4H2O826 mg / L，KNO3 607 mg / L，NH4H2PO4 115 mg / L，MgSO4·7H2O483 mg / L，微量元素为：NaFe-EDTA 20〜40 mg / L， H3BO32.86 mg / L，MnSO4·7H2O 2.13 mg / L，ZnSO4·7H2O 0.22 mg / L，CuSO4·5H2O 0.08 mg / L，（NH4）6Mo7P24·4H2Omg / L.达到3至4片真叶时，用水冲洗根部的沙粒，用蒸馏水冲洗两次，然后用1×107细胞/ ml的孢子悬浮液浸泡30分钟。入深度约为1厘米。后取出并放入水培溶液中。
　　期观察根茎。切割后的1毫米材料置于4％戊二醛中进行预固定，用pH 7.2的磷酸盐缓冲溶液冲洗，固定1％的渗透酸后，用乙醇-丙醇梯度脱水并掺入Epon-812环氧树脂中。割超薄切片机并进行双重染色后，在透射电镜下观察细胞结构的变化和致病真菌的感染状态。照李贵琴法，通过范宏固双绿法制备石蜡切片样品。1显示了对尖孢镰刀菌f的抗性的感染过程和组织病理学变化。Sp。果显示，接种后16小时，抗性品种的角质层表面粘附到大量分离或未分离的分生孢子上（图1a）。着角质层变厚，发芽孢子形成的菌丝体会被部分杀死，因为很难提供足够的营养。入表皮细胞的菌丝体在间质空间中发育，相邻的细胞显示出血浆壁的分离（图1b）。壁细胞的细胞壁增厚（图1c），细胞内含物丰富（图1d）。（图1e）。种后40小时，发现皮层薄壁细胞菌丝体产生的孢子（图1f）和薄壁细胞交界处的孢子（图1g）被发现。
　　观察到了细胞壁的增厚和破裂（图1h）。64 h时，导管附近出现少量菌丝体及其孢子（图1i），导管内腔出现大量褐色物质（图1j），导管的某些壁变成揭示出分泌出一层涂层（图1k），并用无菌丝包裹。88小时后，导管中发生浸润（图1e）。2显示了尖孢镰刀菌f的感染过程和病理变化。Sp。感品种。果表明，接种后16小时，发芽孢子降解了根茎的表皮细胞（图2a）。皮实质细胞中的线粒体和高尔基体等细胞器发育良好且清晰可见（图2b，c）。种后40个小时，皮层薄壁组织细胞壁被溶解，内部有大量孢子（图2d），线粒体的外膜部分破裂，脊柱模糊（图2e） ，f）。细胞间隙中有大量的菌丝，细胞壁变厚了。
　　（图2g）。第64小时（图2h，i），细胞变形，内容物溶解（图2h），当细胞壁破裂时出现小孢子（图2i）。88小时时，筛管中的菌丝体随着grew体的生长而遇到cas体（图2j）。3显示了敏感桂花品种中根茎通道类型的差异。果表明，在抗病品种中有两种类型的渠道，即环形渠道和交联渠道（图3a，b）。入（图3c，桂花树价格d）。金瑞，苗iao等在镰刀菌西瓜的细胞学研究中发现，抗病品种的角质层比易感品种的厚，而且该试验的结果相似。玉金等。究西瓜枯萎病时，没有发现西瓜抗病品种根系的结构差异。建华等对桂花枯萎病的研究发现，抗病品种比易感品种具有更厚的壁被，抗病品种的入侵者具有细胞核，而黄花病的入侵者则具有抗性。感品种不发达。斯等人。
　　信壁布，侵入性物体，棕色物体和其他防御反应的产生会限制菌丝体的膨胀，并且对菌丝体的侵入有一定的阻碍。Chen Ye等人认为，易感品种中有许多带螺纹的导管，而抗病品种中交联的导管最多。试验的结果表明，所选择的两种桂花种类之间存在结构差异：抗病品种具有角质层，并且有两种类型的导管：环形和交联；抗病品种被细菌感染，这些细菌以前会使细胞壁，褐色物质，长满的身体等增厚，而易感品种仅会使细胞壁和cas体增厚。于在该测试中仅选择了两个品种，因此必须通过更多材料来确认测试结果的普遍性。
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