桂花树苗「不同污染水源对桂花树根尖染色体的影响」

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目录：
1、了解肇庆大旺不同污染水源对桂花树根尖的生长是否有抑制作用
2、桂花树根尖分生组织细胞有丝分裂周期中
3、桂花树去皮
4、分别在染毒处理48h
　　

了解肇庆大旺不同污染水源对桂花树根尖的生长是否有抑制作用

　　通过实验,了解肇庆大旺不同污染水源对桂花树根尖的生长是否有抑制作用,对影响桂花树根尖染色体以及对染色体的复制、增值是否会引起异常的影响,进而了解大旺部分污水的水污染程度。

本实验采用肇庆大旺不同来源污水对桂花树进行培养,在培养一段时间后对桂花树根尖进行固定、染色、制片及进行镜检观察,观察500个根尖分生区细胞,对其中正在进行有丝分裂及发生分裂异常的细胞进行计数,桂花树苗依此对实验进行统计分析。

　　

桂花树根尖分生组织细胞有丝分裂周期中

　　桂花树根尖分生组织细胞有丝分裂周期中,染色体异常现象主要出现在中、后、末期,主要有滞后染色体、染色体断片、染色体桥和环、多极化、微核、双核、核固缩、赤道板偏转、不等分裂、染色体分裂不同步、核崩解等异常现象,如图1所示。

桂花树,肇庆大旺各处污水。

烧杯、青霉素小瓶若干、移液管、吸耳球、玻璃棒、量筒、试剂瓶、镊子、剪刀、恒温器。

碱性品红、NaSO、浓HCL、1moL/L的HCL、95%的酒精、冰醋酸、偏重亚硫酸钠、蒸馏水,Carnoy固定液,希夫试剂。

采样点1为大旺某街道渠道水,采样点2为大旺某小区生活污水,采样点3为大旺某污水厂实验室的实验废水,按采集规范要求采集水样。

　　

桂花树去皮

　　桂花树去皮,洗净,选取大小均匀无疤痕的蒜瓣。

置装满蒸馏水的青霉素小瓶中进行培养,水源影响污染水源影响待新根长到约0.5～1.0cm时,随机分成4组,每组9株。其中3组分别用于三个样品水的处理,第4组用自来水作阴性对照。阴性对照组和处理组桂花树分别用自来水或处理液浸没基部连续染毒。每24h更换自来水或者处理液。
　　

分别在染毒处理48h

　　分别在染毒处理48h、72h、96h后,从不同植株上随机剪取桂花树幼根,以卡诺氏液固定24h后转入70%乙醇中4℃保存,对已固定的所有根尖采用Feulgen法染色。切取根尖,将染液吸净后,再滴加蒸馏水,小心加上盖玻片,污染水源影响不同水源影响注意防止大量气泡产生,然后再覆盖吸水纸,用大拇指轻压,或者用铅笔的橡皮头一端轻敲,使细胞分散开来,便于观察。在显微镜下,对每个处理组随机检查3个根尖,每个根尖观察500个分生区细胞,对正在进行分裂的细胞及发生异常的细胞进行计数。计算桂花树根尖分生区细胞有丝分裂指数及染色体畸变率。在显微镜下,对每个处理组随机检查3个根尖,每个根尖观察500个分生区细胞,对影响水源影响对正在进行分裂的细胞及发生异常的细胞进行计数。分裂异常的镜检图如图2、图3所示。对各样品污水处理48h、72h、96h的桂花树和对照组桂花树根尖分别固定、解离、漂洗、染色,镜检其分生细胞的有丝分裂指数,结果见表1及图4。从表1及图4可以看出,有丝分裂指数的降低表现出污水样品-效应关系和时间-效应关系。即在同一处理时间,用样品3处理的桂花树根尖的有丝分裂指数最低,有丝分裂指数:阴性对照>样品1>样品2>样品3;在同一处理组中,随着处理时间的增长,有丝分裂指数降低,即处理48h的有丝分裂指数>处理72h的有丝分裂指数>处理96h的有丝分裂指数,即呈现明显的时间-效应关系。从96h处理结果来看,样品1、样品2和样品3处理组有丝分裂指数分别为对照组的88.1、84.52%和79.76,这说明样品3对桂花树根尖细胞进入分裂态具有较大的阻滞作用,对影响的抑制细胞有丝分裂,样品2次之,样品1影响最小。经实验比较,大旺某污水厂实验室废水的污染程度>大旺某生活小区污水的污染程度>大旺某街道渠道水,且有丝分裂指数的降低呈现明显的时间-效应关系;各污水处理组的细胞异常发生率与对照组相比,均有极显着性的统计学差异,并呈现一定的时间-效应关系。实验表明,不同污染水源对桂花树根尖分生细胞有丝分裂具有阻滞作用,并诱发有丝分裂异常的发生。